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研究背景: 结直肠癌(Colorectalcancer,CRC)的死亡率居全球恶性肿瘤的第4位,其发病率和死亡率近年在我国有持续升高的趋势。结直肠癌的死亡率与发现疾病的时间密切相关,早发现、早诊断及早治疗成为提高结直肠癌治愈率及延长患者生存时间的关键。然而,在如今的临床工作中,对结直肠癌敏感且特异的肿瘤标志物匮乏,因此寻找敏感、特异的肿瘤标志物成为临床亟待解决的问题。 Septin9基因是Hartwel1发现的Septin基因家族成员之一,各类研究已初步证实了血浆甲基化Septin9的表达是结直肠癌的生物学特征之一,可作为诊断结直肠癌者的特异标志物。但在早期筛查和癌前病变中,其敏感度仍较低,有待于通过类似多种基因联合检测的方式或将血浆甲基化Septin9检测与CEA、CA9-9、粪便隐血试验等检测综合评估,以便最大可能地提高结直肠癌的早期诊断率。另外,关于检测血浆甲基化Septin9在结直肠癌术后监测、预测复发、评估生存等方面的报道较少。为研究Septin9甲基化与结直肠癌诊断和复发的相关性,我们通过收集结直肠癌患者及正常人群的外周血液,通过检测血浆Septin9甲基化水平,对其在结直肠癌诊断和复发中是否具有诊断价值进行了初步分析。同时采用经典的肿瘤标志物CEA对其诊断效能进行了评估。癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)是首先在结肠癌患者中发现的一种糖蛋白,是目前应用最为广泛和有效的结直肠癌肿瘤标志物,已有相关研究证实了血清CEA可以作为一个独立因素用于早期诊断结直肠癌以及判断结直肠癌患者预后。我们通过将血浆Septin9甲基化对结直肠癌的阳性诊断率及肿瘤切除后转阴率与CEA的诊断效能及转阴率进行了比对,以此作为判断血浆Septin9甲基化是否能够用于结直肠癌的诊断和复发预测的标准。 同时,因单一肿瘤标志物对结直肠癌的诊断准确率有限,虽然血浆Septin9甲基化及血清CEA检测在结直肠癌诊断和预后中都占有一定的地位,但每个指标单独作为结直肠癌的诊断和预测指标都不能准确而完整的反映结直肠肿瘤的真实情况。因此,对于血浆Septin9甲基化及血清CEA在诊断结直肠癌方面是否具有协同作用,两者联合检测能否提高结直肠癌的诊断效率,我们也进行了初步探讨。血浆Septin9甲基化及血清CEA的单独检测及联合检测在早期筛查、诊断以及预测结直肠癌复发中是一个非常有意义的研究方向。 研究目的:通过检测健康人群和结直肠癌患者血浆Septin9甲基化及血清CEA的表达水平,探索二者在结直肠癌诊断及复发中的意义。 材料与方法: 研究入组条件:①广州医科大学附属肿瘤医院胃肠外科首治;②术后病理组织证实为腺癌;③初诊结直肠癌患者。连续收集2015年12月至2016年4月符合入组标准的结直肠癌患者共35例,其中分为手术组(以手术为主要治疗方案,未接受术前化疗,术后2周进行第1化疗)26例和化疗组(未接受手术,化疗方案为FOLFOX6)9例;同时随机抽取30例健康人作为对照组。用Septin9基因甲基化检测试剂盒(PCR荧光探针法)检测血浆Septin9甲基化水平,由广州医科大学附属肿瘤医院检验科采用放射免疫荧光检测血清CEA表达水平。主要研究指标包括血浆Septin9甲基化与血清CEA在结直肠癌患者及健康人中的诊断阳性率、血浆Septin9甲基化与血清CEA诊断的阳性符合率、手术前后和化疗前后血浆Septin9甲基化与血清CEA的动态变化以及两者阳性表达水平与结直肠癌患者各临床各病理因素之间的关系。 分析方法:采用SPSS16.0软件进行统计学分析,所有假设检验比较均为双侧的,P<0.05为差异具有统计学意义。计量资料两组组间比较采用独立样本t检验。计数资料组间比较采用行×列卡方检验。 结果: (1)结直肠癌患者中血浆Septin9甲基化阳性26例,阴性9例,阳性率为74.3%;健康人群中血浆Septin9甲基化阳性0例,阴性30例,阳性率为0%,两者比较差异具有统计学意义(P=0.000)。 (2)结直肠癌患者中手术组血浆Septin9甲基化阳性20例,阴性6例,经手术完全切除肿瘤后由阳性变为阴性15例,持续阳性5例,转阴率为75%;化疗组血浆Septin9甲基化阳性6例,阴性3例,肿瘤持续存在的化疗组患者经化疗后由阳性变为阴性1例,持续阳性5例转阴率16.67%,两者比较差异具有统计学意义(P=0.01)。 (3)血浆Septin9甲基化与性别、年龄、肿瘤部位及TNM分期等临床因素无相关性(P值均>0.05)。 (4)在本研究中,结直肠癌患者血清CEA阳性21例,阴性14例,阳性率为60%;健康人群阳性3例,阴性27例,阳性率为10%,两者比较差异明显,具有统计学意义(P=0.00),血浆Septin9甲基化与血清CEA对结直肠癌诊断的阳性符合率为74.3%。与此同时,结直肠癌患者中手术组血清CEA阳性15例,阴性11例,经手术完全切除肿瘤后由阳性变为阴性11例,持续阳性4例,转阴率73.3%;化疗组血清CEA阳性6例,阴性3例,肿瘤持续存在的化疗组经化疗后由阳性变为阴性1例,持续阳性5例,转阴率16.67%,两者比较差异具有统计学意义(P=0.018)。血清CEA与性别、年龄、肿瘤部位及TNM分期等临床因素无相关性(P值均>0.05)。 (5)血液CEA在本研究中对结直肠癌的阳性率为60%,血浆Septin9甲基化的阳性率为74.3%,虽后者的阳性率稍高,但两者比较差异无统计学意义(P=0.203);但血浆Septin9甲基化与CEA联合检测的阳性率为82.9%,与CEA单独检测比较差异有统计学意义(P=0.034)。 结论: (1)血浆Septin9甲基化具有可作为结直肠癌的筛查和诊断指标的潜能,其对结直肠癌的诊断效能与血清CEA相类似,阳性符合率达74.3%,且本研究中Septin9甲基化诊断结直肠癌的敏感性稍优于血清CEA。 (2)血浆Septin9甲基化与结直肠癌患者的带瘤状态显著相关,手术切除肿瘤后血浆Septin9甲基化转阴率为75%,血清CEA转阴率为73.3%,表明与CEA相类似,血浆Septin9甲基化同样具有预测结直肠癌术后复发的潜能,但其预测能力的灵敏度及特异性仍需进一步研究。 (3)血浆Septin9甲基化及血清CEA联合检测的敏感性优于血清CEA单独检测,两者联用可以提高结直肠癌诊断的阳性率,具有一定的临床应用价值。