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目的:体外分选严重烧伤后大鼠肠道淋巴结中CD3+T细胞及Treg细胞,予以不同浓度Treg与CD3+T细胞体外共培养,以此来探讨Treg浓度的升高对肠道T细胞免疫功能的影响。方法:将10只SD大鼠用控时控温控压蒸汽烫伤仪在每只大鼠背部造成全身体表面积为30%的III度烧伤,于伤后12小时颈椎脱臼处死大鼠,提取肠道淋巴细胞,抗原特异性玻璃柱法纯化CD3+T细胞,采用免疫磁珠分选技术分选CD4+CD25+Treg细胞,将纯化后的CD3+T细胞随机分成空白对照组和A、B、C、D共4个浓度组。各组CD3+T细胞均为106个,其中空白对照组不加Treg,各个浓度组分别加入1×104、2×104、5×104、1×105个分选好的Treg细胞,体外共培养12小时后,采用流式细胞技术检测CD4+/CD8+T细胞、Th1/Th2细胞比例及T细胞凋亡率;采用ELISA方法检测IL-2和IL-10在培养液上清中的表达变化。结果:(1)严重烧伤后不同浓度的Treg作用于T细胞后,随着浓度升高,各组CD4+、CD8+T细胞数目逐步下降,CD4+/CD8+T细胞比例也随之下降,与空白对照组(1.22±0.12)比较,A组(0.95±0.08)比例出现下降,D组(0.35±0.09)比例明显下降,各组差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)严重烧伤后不同浓度的Treg细胞作用于T细胞后,与空白对照组比较,各组Th1/Th2细胞比例逐渐下降,随着浓度的升高,Th1细胞比例降低,Th2细胞比例明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)严重烧伤后不同浓度的Treg作用于T细胞后,随浓度升高,各组T细胞总调亡率逐步升高,与空白对照组(32.04±1.84)比较,A组(35.25±2.04)T细胞总调亡率升高,D组(51.69±1.47)T细胞总调亡率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)(4)与空白对照组比较,随浓度升高,各组培养上清液的IL-2表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);而IL-10表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大鼠严重烧伤后肠道Treg细胞的升高,可能参与了肠道的T细胞免疫紊乱的过程。随着Treg浓度的升高,CD4+/CD8+T细胞比例也随之下降,促进Th1向Th2飘移,T细胞凋亡率升高,IL-2表达下降、IL-10表达升高,产生免疫抑制状态,适度减少Treg的数目或抑制其活性,可能作为纠正烧伤后免疫功能抑制状态的一个新的靶点。目的:观察严重烧伤后大鼠肠道淋巴结辅助性T17细胞(Th17)及调节性T细胞(Treg)比例变化情况,门静脉血及肠黏膜组织中IL-17A、IL-6水平变化及肠黏膜损伤程度,初步探讨Th17/Treg及Th17相关细胞因子变化对肠黏膜屏障损伤的影响。方法:把50只健康雄性SD大鼠,随机分成正常对照组和烧伤后12小时、24小时、36小时、48小时(T1-T4),每组各10只,用控时控温控压蒸汽烫伤仪在每只烫伤组大鼠背部造成全身体表面积为30%的III度烧伤,于各时相点颈椎脱臼处死SD大鼠,提取肠道淋巴细胞,运用流式细胞仪检测Th17及Treg细胞的比例变化,提取肠黏膜组织上清液采用ELISA方法检测IL-17A、IL-6的表达变化,取门静脉血清采用ELISA方法检测IL-17A、IL-6含量的表达变化,同时取距回盲部7cm的一段小肠组织进行切片、HE染色,显微镜下观察损伤程度,运用改良chiu评分法进行评分。结果:(1)严重烧伤后各个时相点,Th17细胞比例逐渐升高,与正常对照组(0.82±0.07)比较,T1组Th17比例(1.54±0.07)出现升高,T4组Th17比例(3.03±0.08)显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)严重烧伤后各个时相点,Treg细胞比例逐渐升高,与正常对照组(8.07±0.82)比较,T1组Treg比例(17.42±1.17)出现升高,T4组Treg比例(40.66±0.93)显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)严重烧伤后各个时相点门静脉血中IL-6、IL-17A均升高,与正常对照组IL-6(36.3±2.83)、IL-17A(16.3±1.25)比较,T1组IL-6(105.7±5.89)、IL-17A(31.3±4.77)含量均升高,48小时T4组IL-6(263.9±5.30)、IL-17A(107±3.43)含量均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。(4)严重烧伤后各个时相点肠黏膜组织中IL-6、IL-17A均升高,与正常对照组IL-6(5.1±0.74)、IL-17A(18.1±1.60)比较,T1组IL-6(16.3±1.16)、IL-17A(29.2±2.49)含量均升高,T4组IL-6(53.4±2.99)、IL-17A(61.3±3.47)含量均显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。(5)与空白对照组(0)比较,各时相点肠黏膜损伤程度评分均升高,其中T1组为(2.7±0.67),T4组(6.8±0.63)肠黏膜损伤最重,差异有统计学意义(P<0.01)。(6)将Th17、Treg、门静脉血IL-6、IL-17A,小肠组织IL-6、IL-17A表达与肠黏膜损伤评分呈正相关,r=0.972,0.969,0.973,0.962,0.970,0.961.P<0.01。Th17/Treg与肠黏膜损伤评分呈负相关,r=-0.814,P<0.01。将Th17、Treg、Th17/Treg、门静脉血IL-6、IL-17A,小肠组织IL-6、IL-17A值作为自变量,肠黏膜损伤评分作为应变量进行多元线性回归分析,显示R=0.978;p<0.01。结论:大鼠严重烧伤后肠道Th17/Treg细胞比例逐渐降低,肠黏膜组织及门静脉血中IL-17A、IL-6逐渐升高,肠黏膜损伤加重,Th17比例、Th17/Treg平衡变化可能与烧伤后肠黏膜屏障损伤及脓毒症有关。