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【目的】探讨PRRX1过表达诱导乳腺癌细胞发生上皮间质转化(EMT)对三苯氧胺(tamoxifen,TAM)耐药机制的研究。【方法】(1)通过脂质体转染法将PRRX1基因及对照质粒空载体分别转染至PRRX1低表达细胞系MCF-7细胞。实验组为转染PRRX1基因的细胞,空白对照组为转染对照质粒空载体的细胞,阴性对照组为MCF-7细胞。(2)采用Western-blot及Real-time PCR方法检测三组细胞中PRRX1基因蛋白及mRNA的表达情况,以验证转染成功。(3)转染成功后24h后,于倒置荧光显微镜下观察转染前后细胞形态变化及转染效率。(4)Real-time PCR方法检测PRRX1基因对上皮间质转化指标——波形蛋白(Vimentin)及E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)mRNA表达水平的影响,以验证高表达PRRX1基因组细胞是否发生上皮间质转化。(5)Western-blot检验转染前后细胞中ER蛋白表达情况,验证PRRX1基因对ER蛋白表达情况的影响。(6)三苯氧胺药物干预24h后,最后采用CCK-8方法检测三组细胞的耐药情况。【结果】实验组细胞转染24h后荧光效率达80%以上,细胞形态由转染前连接紧密的铺路石样转变为连接疏松的长梭形细胞,实验组细胞PRRX1蛋白表达水平与对照组细胞相比明显升高,差异有统计学意义(p<0.001),两对照组细胞之间比较差异无统计学意义(p>0.05)。PRRX1 mRNA在实验组、空白对照组、阴性对照组细胞中(35)CT值分别为(5.20±0.231)、(13.77±0.642)、(13.50±0.360),实验组细胞表达水平与对照组细胞相比明显升高,差异有统计学意义(p<0.001),两对照组细胞之间比较差异无统计学意义(p>0.05)。E-cad mRNA在实验组、空白对照组、阴性对照组组(35)CT值分别为(19.39±0.400)、(18.61±0.108)、(18.47±0.076),实验组细胞表达水平与对照组细胞相比明显降低,差异有统计学意义(p<0.001),两对照组细胞之间比较差异无统计学意义(p>0.05)。Vimentin mRNA在实验组、空白对照组、阴性对照组(35)CT值为(17.82±0.061)、(19.48±0.021)、(19.42±0.082),实验组细胞表达水平与对照组细胞相比明显升高,差异有统计学意义(p<0.001),两对照组细胞之间比较差异无统计学意义(p>0.05)。实验组细胞ER蛋白表达水平与对照组相比明显降低,且差异有统计学意义(p<0.001),两对照组之间比较差异无统计学意义(p>0.05)。TAM作用24h后,实验组细胞IC50明显高于阴性对照组(p<0.001)和空白对照组(p<0.001),差异有明显统计学意义,阴性对照组和空白对照组之间比较其差异无明显统计学意义(p=0.15)。【结论】PRRX1基因过表达可诱导乳腺癌MCF-7细胞发生上皮间质转化现象,降低MCF-7细胞中ER蛋白的表达,并促进其对三苯氧胺产生耐药。