YKL-40蛋白检测及其在食管癌的临床应用研究

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目的:ykl-40基因是近年发现的一个候选癌基因,已在多种肿瘤中检测出其蛋白产物YKL-40的高表达。本课题检测血浆YKL-40蛋白表达水平,分析其与食管癌的相关性,并试图以高通量组织芯片免疫组化方法检测食管癌组织YKL-40蛋白的表达,探讨YKL-40的表达与食管癌的临床意义。方法:1.应用美国Quidel公司商品化酶联免疫检测试剂盒测定127例食管癌患者、11例食管非恶性肿瘤患者及29例健康体检者的血浆YKL-40。2.分析比较血浆YKL-40在各临床病理因素:不同临床分期、肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移、癌栓形成、肿瘤大小、发生部位、性别、年龄下的表达差异。3.分析血浆YKL-40在食管癌手术疗效监测的价值。4.受试者工作曲线分析评价血浆YKL-40对食管癌的临床诊断应用效率及价值。5.高通量组织芯片免疫组化法检测食管癌组织及癌旁组织YKL-40表达。6.原始数据以Excell表格记录,采用SPSS17.0软件进行统计处理。多组样本间比较采用Kruskal-Wallis H检验和Nemenyi秩和检验。结果:1.初发食管癌患者血浆YKL-40中位数为121.02ng/ml,高于健康对照者的33.60ng/ml(p<0.001);11例食管非恶性肿瘤患者血浆YKL-40中位数为149.95ng/ml,同样显著高于健康体检者(p=0.036),但与食管癌患者无差异(p=0.114)。2.肿瘤长径小于3cm和大于5cm的食管癌患者其血浆YKL-40均显著高于中等大小(长径3cm至5cm之间)的患者,其中位数分别为140.77ng/ml、136.82ng/ml和95.37ng/ml,两两比较p均<0.05;食管中段癌患者YKL-40显著低于食管上段与下段者,其中位数分别为92.82ng/ml、155.66ng/ml和161.15ng/ml,两两比较p均<0.05。3.食管癌发生淋巴结转移者其血浆YKL-40高于未转移者,远端淋巴结转移、近端淋巴结转移和无淋巴结转移者,其血浆YKL-40中位数分别为135.49ng/ml、95.19ng/ml和76.7ng/ml,p=0.005;癌栓形成者显著高于无癌栓者,中位数分别为160.3ng/ml和74.72ng/ml,p=0.012。4.血浆YKL-40与食管癌临床分期相关,临床分期从Ⅰ期至Ⅳ期,其血浆YKL-40中位数分别为68ng/ml、71.61ng/ml、146.85ng/ml和110.95ng/ml,临床中晚期患者(Ⅲ期和Ⅳ期)血浆YKL-40高于早期患者(Ⅰ期和Ⅱ期),p=0.016;按肿瘤细胞类型分析,食管腺癌患者血浆YKL-40(中位数206.67ng/ml)高于鳞状细胞癌患者,鳞状细胞癌细胞分化程度,从高分化到低分化分别为130.9ng/ml、88.35ng/ml和102.03ng/ml,三组间血浆YKL-40无差异;肿瘤大体类型分析总组间无差异,但发生数较多的溃疡型(中位数148.93ng/ml)和髓质型(中位数69.23ng/ml)之间有显著差异,前者的血浆YKL-40结果更高。5.以初发食管癌患者、食管非恶性肿瘤患者和健康体检者的血浆YKL-40进行ROC曲线分析,曲线下面积AUC=0.791,82.06ng/ml为血浆YKL-40对食管癌的最佳诊断阈值,在此阈值下,灵敏度和特异度分别为68.9%和80.0%,一致率71.08%,阳性似然比3.44,阴性似然为0.39,阴性预测值为38.56%,阳性预测值为93.39%。6.YKL-40在食管癌组织的癌细胞及食管癌旁组织的高分化鳞状细胞均有表达。结论:1.食管癌患者血浆YKL-40高于健康体检者,且与肿瘤大小、肿瘤部位相关。2.癌栓形成及淋巴结转移的食管癌患者血浆YKL-40显著升高。3.血浆YKL-40蛋白与食管癌临床分期相关。4.ROC曲线分析显示,血浆YKL-40对食管癌具有一定的辅助诊断价值。5.建立了高通量组织芯片免疫组化检测食管癌组织YKL-40的方法。
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