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背景: 艾滋病,也称获得性免疫缺陷综合症(Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS),是由人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)侵犯人免疫系统所致的严重传染病。HIV感染在全球日益流行,已经严重威胁人类生命安全,目前成为了严重的公共卫生及社会问题。随着时代和科技的进步,我们对于HIV已经有了较多的认识与了解,从当初的惶恐不安到目前有信心在“2030年消灭艾滋病”,艾滋病研究发展已经取得的巨大成功。目前针对HIV感染的治疗手段主要是高效联合抗病毒治疗(Highly Active Anti-Retroviral Therapy HAART),通过该治疗手段我们可以控制HIV病毒在人体内的复制,实现免疫功能重建,从而减少机会性感染及肿瘤等发生,大大改善了艾滋病病人的预后,使得艾滋病成为一种可以控制的慢性病毒感染性疾病。 研究表明,HIV病毒在人体中可与宿主基因整合,潜伏在细胞及组织器官中,形成病毒储存库。HAART仅能抑制病毒复制而无法清除病毒储存库,一旦停止抗病毒治疗后,HIV病毒会在数周内反弹,导致治疗失败。所以HARRT治疗必须持续终生,加重了艾滋病患者的心理及经济上的负担。HIV病毒储存库在HIV感染者体内的长期存在已经成为了艾滋病治愈的最主要障碍,如何检测及清除HIV病毒储存库,是目前研究的热点。HIV病毒储存库的检测方法多种,但是或多或少存在高估或者低估病毒储存库大小的可能,病毒生长法(VOA)是目前检测储存库大小的最佳方法。 此外干扰素对HIV-1病毒储存库的作用尚不清楚。有研究认为干扰素可能抑制HIV-1病毒储存库,本实验室前期研究则表明外源性干扰素可能会激活病毒储存库。同时,HIV病毒储存库与细胞因子的关系也是尚未明确的。本研究将针对这两个问题进行探讨。第一部分通过病毒生长法(VOA)检测HIV-1/HCV合并感染者及HIV单一感染者外周血病毒储存库容量大小,探讨α干扰素治疗对HIV-1/HCV合并感染者外周血HIV-1病毒储存库容量的影响。第二部分通过检测1例HIV/HCV合并感染者发生H7N9流感病毒急性感染后血浆内源性干扰素等细胞因子水平和外周血病毒库容量大小,探讨H7N9流感病毒感染后内源性干扰素对HIV-1/HCV合并感染者HIV-1病毒库的影响。 第一部分 α干扰素治疗对HIV-1/HCV合并感染者外周血HIV-1病毒储存库容量的影响 内容和目的: 通过对HIV/HCV感染者外周血单个核细胞(PBMC)中HIV-1病毒储存库的检测,研究干扰素对HIV-1病毒储存库容量的影响,探讨干扰素是否能成为清除病毒库的方法,为艾滋病功能性治愈提供方法和依据。 方法: 本研究以广州医科大学附属市第八人民医院收治的HIV-1单一感染患者、HIV-1/HCV合并感染患者为研究对象(所有研究对象在抗病毒治疗前CD4+T细胞计数均<200cells/ul)。当HIV-1/HCV合并感染患者治疗前CD4+T细胞计数<200个/ul时,根据指南应该先HAART治疗后抗HCV治疗,故本研究选取HIV-1单一感染HAART治疗患者10例(0-96周)、HIV-1/HCV合并感染HAART后同时使用聚乙二醇干扰素(pegylated interferon,Peg-IFN)和利巴韦林(ribavirin,RBV)(PR)抗HCV治疗患者8例(PR0-48周,停药后48周记为PR96周),通过采用病毒生长法(VOA)方法分别检测HIV单一感染者HAART0W、24W、48W、96W及HIV/HCV合并感染者干扰素抗HCV治疗0W、24W、48W、96W(干扰素治疗终止后48W)各时间点PBMC中病毒库容量,探讨α干扰素治疗对HIV-1/HCV合并感染者外周血HIV-1病毒储存库的影响。 第二部分 H7N9流感病毒感染后内源性干扰素对HIV-1/HCV合并感染者HIV-1病毒库的影响 内容和目的: 分析1例HIV/HCV合并感染者发生H7N9流感病毒急性感染后血浆内源性干扰素及HIV-1病毒库容量变化,研究H7N9流感病毒感染后内源性干扰素对HIV-1/HCV合并感染者HIV-1病毒库的影响,从而为达到艾滋病功能性治愈提供一定的理论依据,为达成2030年前全球消灭艾滋病的目标而寻找途径。 方法: 本研究以2016年12月广州医科大学附属市第八人民医院收治的1例特殊的H7N9流感病毒感染患者(数年前已确认感染HIV及HCV病毒)为实验对象,通过液相悬浮芯片技术检测血浆中内源性干扰素等细胞因子,分析H7N9禽流感病毒急性感染对于体内免疫状态水平变化;分别通过real timePCR检测患者外周血HIV-1totol DNA及integratedDNA评估病毒储存库大小(因样本数量过少,无法采用VOA检测),研究H7N9流感病毒感染后内源性干扰素对HIV-1/HCV合并感染者HIV-1病毒库的影响。 结果: 第一部分 1.HIV单一感染组HAART治疗前HIV-1PBMC病毒储存库容量高于治疗后各个时间点,HAART后各时间点无明显变化。 2.HIV-1/HCV合并感染组PR治疗后HIV-1病毒储存库有升高趋势,停止PR治疗后出现下降,但差异无统计学意义。 第二部分 1、急性H7N9流感病毒感染导致内源性干扰素水平升高。 2、H7N9/HIV/HCV合并感染者急性H7N9流感病毒感染后,外周血HIV-1total DNA及HIV-1integrate DNA有升高趋势,血浆HIV-1RNA出现反弹。 结论: 1、α干扰素治疗对HIV-1/HCV合并感染者外周血HIV-1病毒储存库容量无明显影响。 2、长期HAART治疗不能有效降低HIV-1病毒储存库容量。 3、内源性干扰素可能激活HIV-1/HCV合并感染者外周血HIV-1病毒储存库。