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目的：探讨采用半麦管作为冷冻载体玻璃化冷冻小鼠不同发育时期的囊胚，比较各组囊胚冷冻复苏后的存活率及囊胚孵出率，选出一个冷冻效果最佳的囊胚分期，为玻璃化冷冻技术应用于临床提供一个实验依据。观察人工辅助脱水在玻璃化冷冻中应用后，胚胎存活及继续发育的能力，验证人工皱缩的安全性及有效性。
方法：应用半麦管玻璃化冷冻小鼠囊胚，囊胚按照发育阶段分为早期囊胚组、囊胚期囊胚组、扩张期囊胚组、孵出期囊胚组，以15%二甲基亚砜+15%乙二醇+Ficoll400(10mg/mL)+0.65mol/L蔗糖为玻璃化冷冻液，冷冻早期囊胚39个、囊胚期囊胚75个、扩张期囊胚106个、孵出期囊胚27个，以同期未做冷冻的90个囊胚为对照组，观察冷冻复苏后囊胚的存活及继续发育情况。
结果：
1.各期囊胚复苏后，存活率分别是48.7%、45.3%、39.6%、66.7%；孵出率分别是73.7%、67.6%、66.7%、66.7%。存活率、孵出率均低于对照组(P<0.05)；孵出期囊胚冷冻复苏后存活率66.7%高于囊胚期囊胚和扩张期囊胚45.3%、39.6%(P<0.05)。
2.冷冻前对扩张期囊胚进行人工皱缩，复苏后皱缩组囊胚复张率80%高于未皱缩组39.6%，差异有统计学意义(P<0.05)；复苏后皱缩组囊胚孵出率75%高于未皱缩组66.7%，差异无统计学意义(P>0.05)。
结论：
1.玻璃化冷冻能够较好地保存晚期发育胚胎，方便、快速、省时，为临床应用提供了实验依据。
2.各期囊胚的冷冻复苏后的存活率、孵出率与对照组相比均有统计学差异，玻璃化冷冻的安全性有待于进一步研究。
3.孵出期囊胚也可以冷冻保存，且存活率较高，复苏后有利于囊胚种植。
4.对扩张期囊胚冷冻前进行人工皱缩，可以提高扩张期囊胚冷冻复苏后的存活率和孵出率，但人工皱缩的安全性和有效性有待于大量的动物实验来近一步证实。