流式细胞术检测P-selectin、t-PA和CTGF的方法学评价及临床应用

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目的:对流式细胞术检测纤溶标志物(P-selectin、t-PA、CTGF)方法学性能评价,并探讨P选择素(P-selectin)、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和结缔组织生长因子(CTGF)与急性冠状动脉综合征及其亚型的相关性。  方法:运用FACSArray流式细胞仪检测系统测定校准品P-selectin、t-PA、CTGF水平,从其精密度、准确度、分析灵敏度、干扰试验等方面进行方法学评价。评估健康对照组和ACS组血清P-selectin、t-PA、CTGF水平与ACS组及其亚组的相关性。  结果:流式细胞术检测三种纤溶标记物校准品的批内变异系数高低两个浓度的变异系数P-selectin分别为4.13%和6.10%,t-PA变异系数分别为2.89%和2.26%, CTGF变异系数分别为2.96%和3.75%,批间变异系数高低两个浓度的P-selectin变异系数分别为4.63%和11.00%,t-PA变异系数分别为12.20%和6.30%,CTGF变异系数分别为9.02%和8.78%。P-selectin、t-PA、CTGF高低两个浓度的相对偏差分别为5.28%和2.71%、1.23%和4.16%,2.23%和1.85%;P-selectin、t-PA、CTGF校准品检测灵敏度为15.66 ng/L、0.99ng/mL、14.91 ng/L。聚苯乙烯微球、高浓度的甘油三酯(17mmol/L)、血红蛋白(12g/L)和胆红素(170umol/L)干扰物对P-selectin测定时的干扰率分别为4.10%、14.65%、13.89%和10.94%;对t-PA测定时的干扰率分别为2.90%、15.65%、13.23%和12.94%;对CTGF测定时的干扰率分别为3.98%、12.76%、11.35%和11.14%;低浓度的甘油三酯(0.76mmol/L)、血红蛋白(0.5g/L)和胆红素(1.7umol/L)干扰物对P-selectin测定时的干扰率分别为4.12%、3.98%和2.43%;对t-PA测定时的干扰率分别为3.65%、3.76%和2.94%;对CTGF测定时的干扰率分别为4.45%、3.49%和2.94%;正常对照组与ACS各亚组(SAP组、UAP组、AMI组)P-selectin的浓度范围分别为4333.2〒274.6 ng/L,54102.1〒3401.5 ng/L、70745.6〒2784.5 ng/L、82998.7〒7218.2 ng/L;t-PA的浓度范围分别为7.82〒3.55 ng/mL,9.48〒2.24 ng/mL,17.68〒2.03 ng/mL,27.99〒2.53ng/mL, CTGF的浓度范围分别为109.37〒9.28ng/L,209.18〒18.28ng/L、278.29〒24.55ng/L、389.38〒30.87ng/L,(P<0.05)。P-selectin、t-PA和CTGF二元Logistic回归分析系数B分别为0.715、0.571、0.779。  结论:流式细胞术检测系统检测 P-selectin、t-PA和CTGF性能符合临床实验室标准,可满足临床检测需求。P-selectin、t-PA和CTGF血清水平与ACS各亚型有统计学意义,与ACS严重程度呈正相关,对ACS的危险分层有重要意义。
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