目的线粒体能量代谢是免疫活动的中心,在肿瘤免疫中发挥重要作用,同时也是沟通免疫与肿瘤的桥梁。中药黄精具有抗肿瘤,调节免疫活性等药理特性。然而,黄精是否影响免疫细胞线粒体能量代谢来联系黄精调节免疫与抗肿瘤的作用,我们不得而知。本实验通过研究黄精在肿瘤相关巨噬细胞能量代谢以及其在肺癌中的抗癌的分子机制来探索黄精在抗肿瘤与调节免疫方面的具体机制。方法用IL-4构建M2巨噬细胞模型;CCK8实验检测检测黄精对RAW264.7和THP-1细胞活性的影响,确定用于后续实验给药浓度;qPCR实验检测M2型巨噬细胞标志ARG1和CD206的mRNA的表达以及M1巨噬细胞细胞因子IL-1β、TNFαmRNA的表达、Western blot实验检测M2型巨噬细胞标志蛋白ARG1和CD206的表达,流式细胞术检测M2巨噬细胞表面蛋白C206。Western blot实验、qPCR实验以及流式细胞术检测不同浓度黄精（0,1,2mg/ml）对M2巨噬细胞极化的作用;制备相关条件培养基,进行划痕实验和用Western blot技术检测迁移相关蛋白mmp2、mmp9的表达。细胞能量代谢分析仪（Seahorse）分析M2巨噬细胞线粒体压力测试和糖酵解速率测定;ATP检测试剂检测M2型巨噬细胞的ATP产量。Western blot检测不同浓度黄精对AMPK/PDH通路（pAMPK、pPDH、PDK）蛋白表达的影响以及黄精与AMPK抑制剂（Compound C）联用对pAMPK、pPDH、PDK、CD206、Arg1蛋白表达的影响。构建小鼠Lewis细胞同种异体移植瘤模型,同时观察黄精对LLC肺癌细胞荷瘤小鼠瘤体生长的影响。Western blot检测小鼠瘤体中的pAMPK、pPDH、PDK、CD206、Arg1、mmp2、mmp9等蛋白的表达,并留取小鼠血清进行血清肝AST/ALT、血肌酐的检查。结果M2巨噬细胞模型构建成功。CCK8实验表明黄精浓度＜2.5mg/ml时对巨噬细胞无明显细胞毒作用,根据实验结果选取黄精1,2mg/ml药物浓度用于后续实验;Western blot实验结果显示,黄精可抑制M2巨噬细胞标志Arg1和CD206蛋白表达,qPCR实验结果提示黄精抑制D206、Arg相关基因的表达,并且提升M1巨噬细胞细胞因子IL-1β、TNFα水平。流式细胞术检测到黄精药物浓度升高,CD206表达降低;使用条件培养基干预后的A549细胞划痕实验结果证明黄精干预后的条件培养基能抑制A549细胞迁移,且mmp2、mmp9蛋白表达下调;ATP检测及Seahorse实验显示黄精可以降低M2巨噬细胞ATP产量、耗氧率（OCR）,提升细胞外酸化率（ECAR）,抑制M2巨噬细胞的能量代谢;进一步研究机制发现,黄精抑制pAMPK、pPDH蛋白的表达,黄精联合AMPK抑制剂（Compound C）使用后,pAMPK、pPDH蛋白表达更低。同时,体内实验研究发现黄精抑制小鼠瘤体生长,Western blot检测小鼠瘤体组织中AMPK/PDH通路相关蛋白的变化发现,黄精抑制pAMPK、pPDH、CD206、Arg1、mmp2、mmp9等蛋白的表达,增加PDK的表达。血清微板实验结果证实黄精作用于小鼠后,对小鼠肝功能、肾功能无损伤作用。结论本研究证实黄精通过抑制AMPK/PDH信号通路,下调M2巨噬细胞线粒体氧化磷酸化,抑制M2巨噬细胞极化,将巨噬细胞表型转化为抗肿瘤的M1表型从而达到抑制肿瘤细胞迁移、提升巨噬细胞的抗肿瘤免疫作用。并且中药黄精无明显肝肾功能损害作用。这些结果表明,黄精作为中药临床上可以发挥辅助治疗肺癌的作用。