胎儿来源的间充质干细胞的生物学特性以及间充质干细胞在肝纤维化中治疗机制的研究

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间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)存在于成人体内许多组织中,可以治疗许多损伤性疾病。尽管在细胞基础上的研究已经取得了很多进展,但是在细胞的来源、扩增和分化成受损组织细胞来修复损伤等方面,还是有很多需要进一步研究的地方。间充质干细胞有很强的克隆形成和扩增能力,并且具有向成骨,脂肪,软骨,神经和内皮等多向分化潜能。MSCs已经应用于很多疾病的临床治疗,包括肝硬化,急性心梗,自身免疫,辅助骨髓移植,神经系统损伤等。本研究的第一部分旨在研究胎儿骨髓源和胎儿脂肪源的间充质干细胞的克隆率,基本的表型,分化能力。我们已成功的从胎儿体内多种组织(骨髓和脂肪)分离得到单克隆来源的间充质干细胞。从多组织中获得的干细胞,形态上基本与骨髓源Flk1+CD31-CD34-多能干细胞相似,它们经过体外培养后,均呈成纤维样;具有稳定的表型特征,即Flk1、CD105、CD44、CD29为阳性,内皮细胞的特征性表型vonWillebrand factor(vWF)、CD31,造血细胞的表型CD34、CD45、CD11a、CD11b,以及HLA-DR均为阴性;具有能向三个胚层细胞分化的特性。在第二部分,我们研究了成体脂肪源的间充质干细胞能否作为肝纤维化的一种治疗手段,围绕着间充质干细胞能否抑制肝脏成纤维细胞的增殖和活化展开研究,初步探讨了运用成体脂肪源的间充质干细胞治疗肝纤维化的可能性及可行性。本论文的第三部分旨在研究人类胎盘组织中分布的干细胞的生物学特征。首先从胎盘中通过极限稀释法分离得到Flk1+CD31-CD34-干细胞,它们具有多系分化的潜能,在单细胞水平上能分化成上皮,内皮和神经样细胞,分析其形态、生长方式及主要的免疫表型,均与我们从成人骨髓组织分离得到的干细胞一致,并在单细胞水平上证实胎盘来源的Flk1+CD31-CD34-细胞在适宜条件下能够向三个胚层的细胞(肝细胞;内皮细胞;神经细胞)分化。
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