背景:变应性鼻炎（Allergic rhinitis,AR）是耳鼻咽喉头颈外科发病率最高的过敏性疾病之一;是变应原与特异性IgE结合所导致的速发型变态反应在鼻腔黏膜的局部表现。AR症状控制不佳会导致夜间睡眠质量受损、白天疲乏,进而显著影响患者的工作或学习效率和总体生活质量。AR的发病机制与遗传和环境因素有关,但确切的病因尚不清楚。近年来研究发现与AR发病相关的T细胞模式由传统的Th1/Th2模式转变为与Thl、Th2、Th9、Th17、Tfh及调节性T（Treg）细胞关联型模式;Treg细胞是其中唯一发挥炎症负性调节作用的细胞类型,而其余细胞亚群均与炎症反应呈正相关。Treg细胞在维持自身免疫耐受方面发挥重要作用,其相当一部分免疫调节作用是借助于IL-10、IL-35、TGF-β等负调节细胞因子进行的。最近有研究表明变应性哮喘患者体内CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞数目减少,但是少有研究常年性持续性中重度AR患者体内CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞的变化以及这两种细胞与三种细胞因子之间的联系。目的:本实验主要采用流式细胞术（Flow Cytometry,FCM）分析常年性持续性中重度尘螨过敏AR患者外周血中CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞水平变化、研究这两类Treg细胞在AR发病机制中的作用;采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA）技术测定常年性持续性中重度尘螨过敏AR患者外周血中Treg细胞相关细胞因子（IL-10、IL-35、TGF-β）浓度,探究各细胞因子在AR发病中的作用,并进一步分析两类Treg细胞亚群及三种细胞因子在AR发病机制中可能的联动作用。方法:选取从2020年5月至2020年10月之间就诊于江苏省苏北人民医院耳鼻咽喉头颈外科门诊且年龄介于18-60岁之间符合常年性持续性中重度尘螨过敏诊断标准的AR患者40例为实验组,另随机选取年龄与性别匹配的健康志愿者20例为对照组。所有研究对象均采取晨空腹前臂静脉血2份（5ml+5ml）,其中一份血样经离心、裂红、洗涤等处理后使用流式荧光标记的鼠抗人细胞表面单克隆抗体（共5种,分别为APC-Cy7标记的细胞表面CD3单抗、FITC标记的细胞表面CD4单抗、BV510标记的细胞表面CD8单抗、BV421标记的细胞表面CD25单抗、BV711标记的细胞表面CD127单抗）染色;调节补偿后上机检测各样本并得出二维流式散点图,按照一定顺序设门分离出CD4+CD25+CD127low/-（CD4+Treg）细胞并观察其占CD4+T淋巴细胞中的百分比（%）、再从淋巴细胞中分离出CD8+CD25+（CD8+Treg）细胞并观察其占CD8+T淋巴细胞中的百分比（%）。另一份经离心冻存后分别使用人IL-10、IL-35和TGF-β ELISA检测试剂盒按照加样、加酶、洗涤、染色等步骤测定各样品中3种细胞因子在450nm波长处的吸光度、代入标品曲线回归方程式并计算出所有实验对象外周血中3种细胞因子的实际浓度（单位pg/mL）。使用SPSS 22.0统计软件进行统计分析,实验组和对照组CD4+Treg细胞和CD8+Treg细胞所占百分比以均数±标准差（X±SD）表示（单位为%）,实验组和对照组血清中3种细胞因子浓度以均数±标准差（X±SD）表示（单位为pg/mL）。实验组和对照组之间数据比较采用Mann-Whitney U检验,对实验组CD4+Treg细胞、CD8+Treg细胞亚群与3种细胞因子间的相关性采用Spearman秩相关分析进行分析并计算出相关系数r。P<0.05认为有统计学差异。结果:对于外周血中CD4+Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比,实验组（AR患者）较对照组（健康人群）明显降低（P=0.000<0.05）;而对于外周血中CD8+Treg细胞占CD8+T淋巴细胞的百分比,实验组（AR患者）较对照组（健康人群）明显降低（P=0.000<0.05）。对于外周血中血清IL-10和IL-35浓度,实验组（AR患者）较对照组（健康人群）均明显降低（P=0.000<0.05,P=0.000<0.05）;而对于外周血中血清TGF-β浓度,实验组（AR患者）较对照组（健康人群）明显升高（P=0.000<0.05）。分析实验组（AR患者）外周血中各细胞与细胞因子间关联性后发现仅CD4+Treg细胞百分比与IL-35浓度之间呈现负相关关系（r=-0.334,P=0.035）。结论:1、CD4+Treg细胞数目的减少在AR发病机制中发挥重要作用,可能与其对环境变应原的异常Th2型免疫反应的抑制作用降低有关;2、AR患者中CD8+Treg细胞数目的减少与AR的发病有关,这可能是由于其抑制性作用降低所致;3、IL-10分泌机制受损与AR发病有关,该受损机制可能会导致变应原免疫耐受失调;4、IL-35浓度的降低可能与AR的局部炎症有关,且提升AR患者体内IL-35浓度有望成为未来的治疗方向;5、常年性持续性中重度AR患者体内的TGF-β浓度主要表现为升高,这可能与其促炎作用有关。