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随着免疫分析技术在食品安全、临床诊断、环境污染物残留检测等方面的广泛应用及迅速发展,对于免疫分析中至关重要的免疫识别元件的制备提出了更高要求,众多新型识别元件应运而生。多肽分子以其诸多优点已成为目前的研究热点之一,且有望成为潜在的新型识别元件。多肽分子量小,对靶分子的识别尤其精准,可结合到单抗无法识别的靶蛋白隐藏的位点;且相对于传统单抗的制备周期长、难度大、成本高昂,多肽分子制备快速、易于修饰改造、价格低廉。此外,大分子抗原（蛋白、细菌、病毒等）的免疫分析方法通常以双抗夹心方式为主,获得针对不同抗原表位的配对抗体是建立双抗夹心免疫分析体系的前提和基础。多肽分子所具有的分子量小、识别位点精准且多样的特点,使其可方便的进行抗体配对,从而避免了基于传统抗体的夹心免疫分析中抗体配对困难的问题。本研究以Cry1Ab转基因蛋白为模型,基于噬菌体展示多肽库的淘选及重组质粒构建与表达,制备了特异性识别Cry1Ab的多肽分子识别元件,并将其应用到电化学传感平台,实现了Cry1Ab的超灵敏免疫检测。为其他类大分子抗原的免疫识别元件的制备及免疫分析方法的建立提供一种新思路。主要研究结果如下:1.利用噬菌体展示淘选技术,获得了4个能特异性识别Cry1Ab蛋白的噬箘体展示十二肽（Ab-1,Ab-18,Ab-39,Ab-48）。并建立了基于Ab-1,Ab-18,Ab-39,Ab-48的夹心Phage-ELISA标准曲线,其SC50值分别为398.42 ng/m L,127.81 ng/mL,138.89 ng/mL,148.52 ng/m L。2.设计合成了由Ab-39,Ab-48和Ab-18三个多肽编码基因组成,由刚性linker连接而成的抗Cry1Ab多肽表达基因,并采用重叠延伸PCR方式与鼠源IgE抗体的Fc端基因连接后,克隆至pET-25b载体中,构建了“pET25b-Peptides-Fc”原核表达载体。将重组质粒转化至E.coli Rosetta感受态细胞中,经0.1 mM IPTG诱导表达,获得多肽嵌合抗体Peptides-Fc。3.建立了基于Peptides-Fc的夹心ELISA标准曲线,由多肽嵌合抗体Peptides-Fc替代传统单抗作为捕获抗体,噬菌体展示多肽Ab-39作为检测抗体,进行夹心Phage-ELISA分析,建立的标准曲线SC50值为228.56 ng/mL,线性范围为97.29-536.97 ng/m L。4.基于噬菌体展示十二肽Ab-39,建立了电化学免疫传感器,实现Cry1Ab蛋白的超灵敏检测。免疫传感器以金纳米颗粒修饰金电极,通过共价键结合将抗Cry1Ab的单抗8G2固定于电极表面,以噬菌体Ab-39为检测抗体,在电极表面形成“mAb 8G2-Cry1Ab-Ab39”模式的夹心层,通过方波伏安模式检测不同浓度Cry1Ab蛋白对应的峰电流值。基于二者关系建立标准曲线,其线性范围为0.01-100 ng/m L,检测限为0.007 ng/mL。通过玉米和小麦样品的加标回收实验进行方法学确证,回收率分别为90%-120%,86.7%-120%。