论文部分内容阅读
目的：应用功能分类基因芯片技术研究复发性鼻息肉组织的相关基因,并探讨其在鼻息肉发病和复发中的作用。方法：分别抽提检测10例鼻息肉组织、10例复发性鼻息肉组织、10例慢性鼻窦炎组织和10例正常鼻黏膜组织的总RNA,合成cDNA,在标准96孔PCR反应仪中进行实时定量PCR实验,用扫描仪扫描芯片荧光信号,用2-△△Ct计算JAK-STAT信号通路、MAPK信号通路和NF-κB信号通路中实验组与对照组对应基因的表达差异。为了验证这些发现的可重复性,同时也为了检验我们建立的实验体系的可靠性,我们严格按照第一次实验的设计,重复进行了第二次实验。结果：两次实验共得出与正常对照组比较上调2倍以上的差异基因14个,其中JAK-STAT信号通路9个、MAPK信号通路2个,NF-κB信号通路3个。在差异表达的基因中,主要包括信号转录与转导激活因子、转录因子、细胞因子信号转导抑制因子、表皮生长因子相关因子、细胞周期调节因子、补体因子等。其中可能反映鼻息肉复发状态的基因7个；可能反映鼻息肉状态的基因4个；可能反映鼻黏膜炎症状态的基因1个。结论：用功能分类基因芯片筛选鼻息肉、复发性鼻息肉、慢性鼻窦炎和正常鼻黏膜组织间存在的差异基因是可行的,这将为寻找鼻息肉分类和预后评估的客观实验室指标提供新的方法。目的：检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和抑瘤素M(Oncostatin M, OSM)蛋白在复发性鼻息肉、鼻息肉、慢性鼻窦炎及正常中鼻甲黏膜组织中的表达程度的差异,探讨其在复发性鼻息肉发病机制中的作用。方法：采用蛋白质印迹法分别检测6例复发性鼻息肉、6例鼻息肉、6例慢性鼻窦炎及6例正常中鼻甲黏膜组织中Cyclin D1和OSM的蛋白表达；免疫组织化学技术检测6例复发性鼻息肉、6例鼻息肉、6例慢性鼻窦炎及6例正常中鼻甲黏膜组织中Cyclin D1蛋白的表达及定位,并比较表达程度的差异。结果：(1)免疫组化显示Cyclin D1蛋白在复发性鼻息肉、鼻息肉、慢性鼻窦炎及正常中鼻甲黏膜组织中均有表达,Cyclin D1蛋白主要位于鼻黏膜上皮细胞和腺上皮细胞的细胞核,黄色或棕黄色染色为阳性。蛋白质印迹显示Cyclin D1蛋白和OSM蛋白在复发性鼻息肉、鼻息肉及慢性鼻窦炎组织中的表达均高于正常中鼻甲黏膜组织。(2)复发性鼻息肉组织中Cyclin D1和OSM蛋白表达水平高于鼻息肉、慢性鼻窦炎及中鼻甲组织,差异有统计学意义(P值均<0.05)。结论：Cyclin D1和OSM在复发性鼻息肉组织中表达增高,提示它们可能在鼻息肉的复发中起着重要的作用,可作为检测鼻息肉复发的候选指标。