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血管生成素和碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是重要的促血管生长因子,调节着细胞的增殖、分化和迁移,在肿瘤的发生发展过程中起着重要作用。目前关于血管生成素和bFGF之间相互作用关系的研究还很少,本论文的研究目的在于探究肿瘤细胞中血管生成素和bFGF之间的相互作用关系及其分子调控机制。我们首先在肝癌细胞中建立了高表达和低表达bFGF的细胞株,结果发现高表达bFGF的细胞株中血管生成素的表达降低,而低表达bFGF的细胞株中血管生成素的表达反而升高。在细胞增殖分析中,我们观察到高表达bFGF的细胞株细胞增殖增加,而低表达bFGF的细胞株细胞增殖降低。这一部分的实验结果表明,内源的bFGF负调控血管生成素的表达,并且对肝癌细胞的细胞增殖有促进作用。接着我们在HeLa细胞中稳定转染了血管生成素的正义和反义基因,建立了高表达和低表达血管生成素的稳定细胞株,检测bFGF的表达情况,发现转染正义血管生成素基因的细胞株bFGF的表达量降低了,而转染反义血管生成素基因的细胞株bFGF的表达量升高了,实验结果进一步证实了血管生成素对bFGF基因的表达有负调控作用。我们的工作证实了在肿瘤细胞中bFGF可以负调控血管生成素的表达,同时在转染血管生成素基因的细胞中也发现血管生成素负调节bFGF的表达,这在肿瘤血管生成因子的研究中是个新现象,探讨这两个因子之间相互作用关系的分子机制将有助于肿瘤血管生成方面的研究,对靶向肿瘤血管生成的肿瘤治疗有重要的指导意义。目前关于血管生成素和bFGF调控机制的线索还比较少,根据已有的信息我们提出了两个假设:1.血管生成素作为反式作用因子参与bFGF基因的调控;2.血管生成素与bFGF之间可能存在着负反馈调节。首先,我们在293T细胞中检测了血管生成素对bFGF启动子荧光素酶报告基因活性的影响,结果发现血管生成素抑制了bFGF启动子的活性,进而参与bFGF基因的表达调控。通过检测不同长度的bFGF启动子活性,进一步限定了血管生成素在bFGF启动子上的作用区间在?970bp与?834bp之间。其次,我们通过实验初步验证了血管生成素与bFGF之间存在着负反馈,用外源的bFGF刺激共转染血管生成素表达质粒和bFGF启动子质粒的293T细胞,结果发现外源bFGF的加入补偿了血管生成素对bFGF启动子活性的抑制。因此,我们的结论是血管生成素与bFGF之间的负反馈调节是血管生成素抑制bFGF启动子活性,下调bFGF蛋白的表达,进而又负反馈地抑制了bFGF的基因表达。本论文的研究结果为肿瘤血管生成方面的研究提供了有力的理论依据。