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目的 乌骨藤提取物能抑制肿瘤血管生成,但其机制不明确。本研究通过观察乌骨藤提取物(Marsdeniatenacissimaextract,MTE)对人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)增殖、迁移、凋亡及新生血管生成的影响探讨其作用机制。方法 对HUVEC进行培养,采用MTS法检测MTE对细胞增殖的作用;采用划痕实验观察细胞迁移的变化;采用Hoechst/PI荧光染色法及流式细胞术检测细胞的凋亡及周期;采用ATP、葡萄糖检测试剂盒观察细胞代谢产物变化;采用qRT-PCR检测HUVEC相关基因的表达及采用鸡胚(Chick Chorioallantoic Membrane,CAM)实验观察新生血管的生成。结果 MTE对HUVEC增殖的抑制作用显著,且随浓度的升高其对细胞的抑制率逐步增强(**P<0.01),抑制作用呈剂量依赖效应。体外细胞划痕实验显示,MTE处理组的迁移能力明显低于对照组,进一步验证发现MTE能够抑制HUVEC的迁移运动。Hoechst/PI荧光染色法显示:MTE浓度达到160 μg/mL时,细胞核被Hoechst染成亮蓝色,PI复染呈特征性的细胞凋亡形态;流式细胞仪检测细胞凋亡发现,MTE能促进HUVEC的早期凋亡,将细胞周期阻滞在S期。不同浓度MTE处理24h后,观察ATP代谢及葡萄糖消耗情况,证实MTE处理后ATP/ADP代谢及葡萄糖消耗水平呈下降趋势,具有显著性差异(**P<0.05),表明MTE能够通过抑制HUVEC代谢导致细胞增殖减少。半定量RT-PCR检测MTE作用于HUVEC后相关基因的表达,显示MTE能上调Caspase-3,PICK1和ICA69,LC3-Ⅱ,Beclin-1 和 PTEN 基因的 mRNA 表达水平,下调 Bcl-2,VEGFR,P2Y6R,CCL-2,AKT和mTOR基因的mRNA表达,表明MTE能够影响HUVEC细胞中数个凋亡和迁移相关基因的表达。通过qRT-PCR相对定量检测mRNA显示:MTE处理内皮细胞 HUVEC 后,Caspase-3 mRNA 表达升高,Bcl-2,VEGFR,P2Y6R,CCL-2的mRNA表达减低。体内CAM实验显示,16 μg MTE与PBS组比较,载体内部新生血管数目几乎已经不可见,抑制作用明显(**P<0.01),表明MTE能有效抑制新生血管的生成。结论 乌骨藤提取物在体外具有一定的抑制脐静脉内皮细胞增殖和代谢、促进其凋亡的作用,并在鸡胚实验中明显抑制新生血管生成。