曲霉在发酵工程、食粮存储、医药卫生及饲料工业等方面都有着极其重要的地位。其中的黑曲霉是集安全和具有许多活性强大酶系等诸多优点于一身的优良工业发酵用菌种。正是因为黑曲霉具有非常多的活性强大的酶系,所以在工业中是重要的发酵菌种。黑曲霉是公认安全(GRAS)的微生物,利用黑曲霉生产的酶制剂不仅安全、可靠,而且生长比较快、发酵周期也较短,具有非常明显的优越性。虽然黑曲霉在工业发酵酶类上的作用越来越受到人们的重视,然而如何将其应用于抑菌作用方面的研究报道却很少。为合理开发和利用黑曲霉这一真菌资源,我们以具有自主知识产权的一株黑曲霉Aspergillus niger xj作为研究对象对根癌农杆菌、软腐病菌、白绢病菌以及赤星病菌等常见农业病害菌的拮抗作用和机理进行了探索,为研究开发新型的环境友好广谱微生物杀菌剂提供了理论依据,主要研究结果如下:1、试验以麸皮作为黑曲霉固体发酵培养基质,首先进行单因素试验,对培养温度、接种量、pH值、碳源、氮源、其他添加量、光照、搅拌这几个因素对黑曲霉xj菌株产孢量的影响进行初步筛选。之后进行PB试验,最陡爬坡实验,并由此最终确定了响应面法优化黑曲霉固体发酵的条件为:麸皮培养基中加入MgSO4 1.6‰、葡萄糖10%、(NH4)2SO4 1‰、CaCO3 1.6%、CaSO4 1%;每日光照22.83h,培养71.31 h后进行搅拌。在此条件下,产孢量比优化前的提高了 2.636倍,是PDA培养基的4.58倍。之后将黑曲霉xj菌丝体通过常规溶剂萃取得到乙酸乙酯段、石油醚段、正丁醇段,95%乙醇段,以及水提醇沉段,共计5种极性分离产物;通过超临界萃取得到超临界萃取段的产物。其中,超临界萃取段通过GC-Ms,得到9种产物,在已知的5种化合物中,5-羟甲基糠醛(5-HMF,90.194%)和5,5’-(氧二亚甲基)-双-2-呋喃甲醛(7.843%)是含量最高的产物。2、针对于目标细菌,通过MTT实验得到四种分离产物对根癌农杆菌以及软腐病菌的半数抑制浓度(IC50),发现各分离产物对于两种菌增殖抑制效果都依次为乙酸乙酯<正丁醇<水提醇沉<超临界萃取。3、对于目标真菌,通过生长速率法发现超临界萃取,水提醇沉和正丁醇段对两株菌菌体现出了相对较强的抑制能力,针对于白绢病菌抑制率在第七天分别达到了 93.22%,79.67%,74.11%,同样,针对于赤星病菌在第七天分别达到了 90.89%,61.89%,57.11%。各极性分离段对两种真菌菌株的菌丝生长或孢子萌发均表现了抑制作用。4、经水提醇沉萃取段和正丁醇段,以及超临界萃取段处理真菌,细菌后在短时间内即会使溶液电导率变化百分率明显提高,并且分别在测定后的2h,3h时达到峰值,且不同浓度均高于对照中的电导率变化百分率。5、除去根癌农杆菌之外,其他目标真菌及细菌均有不同程度的核酸大分子物质的泄露,泄露量随浓度和时间的增大而增大。而根癌农杆菌经处理后,在4h时达到峰值,随后下降,表明针对于根癌农杆菌,抑菌效果最好的时段在于3-4h之间。6、各目标菌的空白对照组的琥珀酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶平均比活性均高于经药物处理后的平均比活性,说明黑曲霉xj不同萃取段均对目标菌的两种酶的活性均有一定的影响。7、在实验浓度范围内,水提醇沉萃取段对DPPH自由基的清除率均与质量浓度呈正量效关系,即随着质量浓度增加,对DPPH自由基的清除率也增大。当质量浓度低于45mg/mL时,正丁醇萃取段和超临界萃取段对DPPH自由基的清除率与质量浓度呈正量效关系,随后继续增加质量浓度,清除率几乎不变。当质量浓度低于5mg/mL时,Vc、Trolox和BHA对DPPH自由基的清除率与质量浓度呈正量效关系,随后继续增加质量浓度,清除率几乎不变。几种分离段对ABTS自由基的清除率均与质量浓度同样呈正量效关系,即随着质量浓度增加,对ABTS自由基的清除率也增大。而水提醇沉萃取段在60mg/mL前几乎以线性条件增长,其后在80mg/mL时抑制率达到了 97.41%。