Cryab促进成体细胞的重编程

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KLF4(Kruppel-like facter 4)是一个具有锌指结构域的转录因子,是KIF转录因子家族中很重要的一员,它通过激活或者抑制众多基因的转录和表达,参与多种组织细胞的分化和增殖,及参与并维持胚胎干细胞(ES细胞,embryonic stem cells)的不断自我更新能力,并且在体细胞的重编程过程中发挥了重要作用。Klf4与另外三个转录因子Oct3/4、Sox2、c-Myc-起作用从而参与诱导性多潜能干细胞(iPS细胞)的诱导。但是,Klf4是如何参与调控ES细胞的自我更新及体细胞重编程过程却并不清楚。据报道,Klf4可以直接结合在某些基因的启动子区从而调节基因的转录与表达,在这里我们发现了Klf4的一个新的靶基因。   本文中我们进行了与iPS相关的实验研究。首先,我们发现在小鼠ES细胞中cryab(crystalin alpha B gene,αB-crystallin)的表达水平比在MEF细胞中高很多。αB-crystallin蛋白属于小分子热休克蛋白家族,我们将其克隆并构建到了pMXs-flag质粒载体上。通过逆转录病毒感染的方法发现,Klf4可以转录激活cryab的表达。接着我们通过用不同的基因组合来进行iPS细胞的诱导发现,在iPS诱导过程中cryab能够发挥Klf4的部分功能,代替Klf4进行iPS的诱导,并且能够提高iPS的诱导效率。
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