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皮肤瘙痒（pruritus）是一种迫切需求搔抓来缓解的极为不舒服的皮肤感觉。作为一种常见的皮肤科疾病,瘙痒是特应性皮炎（atopic dermatitis,AD）、荨麻疹、接触性皮炎、结节性痒疹、真菌病和银屑病等皮肤性疾病最常见的临床表现,同时也是很多系统性疾病如肾脏疾病、胆道疾病、甲状腺疾病、恶性肿瘤及艾滋病等的伴随症状。反复的搔抓会引发致痒因子的释放和加重皮肤损伤,进而引起更加剧烈的瘙痒,严重的影响病人的生活质量。目前,与瘙痒有关的神经通路和分子机制开始逐渐被人们发现,包括组胺依赖的瘙痒通路、组胺非依赖的瘙痒通路及这些通路所涉及的受体、递质、神经等。Transient receptor potential vanilloid-3（TRPV3）是一种温度敏感、钙离子通透的非选择性阳离子通道。最近研究证明,TRPV3与瘙痒的产生和发展相关,其功能增强性TRPV3点突变无论在大、小鼠还是在人类体内都会引起严重的搔抓行为。敲除TRPV3小鼠的搔抓反应明显减少。这些研究提示,TRPV3可能是治疗瘙痒的靶点。一直以来,由于没有特异性抑制TRPV3通道的抑制剂以至于难以确认TRPV3是否可以成为治疗瘙痒的药物靶点。同时,人们对TRPV3在瘙痒通路中的具体作用也知之甚少。那么,在体内激活TRPV3通道是否能够引起瘙痒?在组胺非依赖的瘙痒中,TRPV3通道是否发挥至关重要的作用?。研究目的:为了探究以上问题,我们选用天然产物香芹酚作为研究工具药物,探讨香芹酚引起的瘙痒作用及其机制。研究方法:基因鉴定,细胞培养与细胞转染,全细胞膜片钳实验,瘙痒模型建立,急性动物行为学实验。研究结果:1.持续给予250μM香芹酚,可迅速激活TRPA1通道后并伴随电流的快速脱敏;而香芹酚激活的TRPV3电流呈现明显的脱敏推迟或减弱,表现为通道长时间保持在开放状态,说明香芹酚对TRPA1和TRPV3通道均产生激活作用;2.5%香芹酚涂抹SD大鼠耳廓引起明显搔抓行为,初步说明香芹酚作为TRPV3非特异性激动剂能够引起瘙痒;3.采用不同浓度的香芹酚给C57BL/6小鼠进行皮下注射,0.1%香芹酚组和1%香芹酚组小鼠均诱发明显的搔抓行为,且具有浓度依赖性,进一步说明香芹酚作为TRPV3和TRPA1的激动剂能够引起瘙痒;4.采用TRPV3功能缺失小鼠C57BL/6TRPV3-/-,我们进一步评价了香芹酚是否通过作用于TRPV3引起瘙痒。研究发现,TRPV3-/-小鼠较TRPV3+/+小鼠相比,其搔抓次数明显减少(TRPV3+/+,248±10/60 min;TRPV3-/-,90±7/60 min),下降百分比约为65%,初步说明在香芹酚引起的急性瘙痒模型中TRPV3起主要作用;5.采用课题组前期筛选获得的TRPV3特异性抑制剂DAP-1发现,DAP-1能显著抑制香芹酚引起的瘙痒,且随DAP-1浓度的增大抑制作用越强（模型组,542±60/60 min;100μM DAP-1,142±9/60 min;300μM DAP-1,79±6/60 min）,抑制率分别为74%和85%,进一步说明TRPV3在香芹酚引起的瘙痒中起至关重要的作用。研究结论:上述研究结果表明,香芹酚作为皮肤敏化剂或者过敏原所引起的瘙痒主要由TRPV3介导。因此,TRPV3可能是治疗瘙痒的关键靶点。