目的:钙化性主动脉瓣疾病（Calcific Aortic Valve Disease,CAVD）是心血管系统常见疾病,是引起心力衰竭、心律失常、晕厥、猝死等疾病的常见原因之一^[1]。CAVD在老年人中发病率较高,随着人均寿命的延长,发病率将越来越高,但目前为止没有有效的药物减轻或延缓瓣膜钙化,瓣膜钙化进展到晚期,手术置换瓣膜是唯一有效延长生存时间和改善生活质量的方法^[2]。因此研究瓣膜钙化的机制是一项亟待解决的社会性问题,本研究中,选用肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factorα,TNF-α）建立瓣膜肌成纤维细胞表型转化的模型,使用Wnt通路抑制剂DKK-1来研究Wnt/β-catenin信号通路对细胞表型转化的影响。方法:1.从新西兰兔的心脏瓣膜中提取并培养兔的瓣膜肌成纤维细胞（Myofibroblast）,细胞免疫荧光技术进行鉴定;2.选取3-7代细胞用于实验,用CCK-8试剂盒检测不同浓度的TNF-α对肌成纤维细胞的存活率的影响;3.细胞随机分成4组:（1）Control组:加入一定体积的磷酸盐缓冲液;（2）TNF-α组:用10ng/ml的TNF-α处理细胞;（3）TNF-α+DKK-1组:用10ng/ml的TNF-α和10ng/ml的DKK-1处理细胞;（4）DKK-1组:用10ng/ml的DKK-1处理细胞;4组在相同条件下培养7天;通过生化检测试剂盒检测ALP的活性,用Western blotting检测Wnt信号通路蛋白β-catenin、骨化转录因子RUNX2和α-SMA的蛋白表达,用RT-PCR技术检测β-catenin及RUNX2的基因表达水平。结果:1.成功分离出心脏瓣膜肌成纤维细胞,细胞扁平呈梭形、纺锤形或不规则形,排列呈旋涡状或放射状;免疫荧光染色α-SMA染色阳性,Vimentin染色阳性,vWF染色阴性;2.CCK-8检测显示TNF-α对肌成纤维细胞无明显细胞毒性;3.TNF-α组与Control组相比,ALP活性,RUNX2、β-catenin及α-SMA的蛋白表达以及RUNX2和β-catenin的基因表达水平明显增高（P<0.05）;TNF-α+DKK-1组与TNF-α相比,上述指标明显降低（P<0.05）;DKK-1组和Control组相比,无明显变化（P>0.05）。结论:Wnt/β-catenin信号通路参与TNF-α诱导的主动脉瓣膜肌成纤维细胞向成骨细胞样表型转化过程,通过抑制Wnt通路信号,可以减缓瓣膜的钙化进程。