间充质表皮转化因子（c-Met）,又称肝细胞生长因子受体（HGFR）,为异源二聚体酪氨酸激酶的一个重要成员,磷酸化的c-Met可激活诸多下游信号通路,这些通路通常参与调节细胞增殖、存活、运动、迁移和血管生成等诸多生理过程。而c-Met的异常活化则与多种人实体瘤的发生发展密切相关。小分子抑制剂因可阻断HGF依赖及HGF非依赖型c-Met的异常激活,现已受到人们的持续性关注。多组分反应可从简单的前体快速构建结构复杂多样及“类药”的小分子化合物库以备先导活性分子的筛选。其中,异腈导向的Passerini三组分反应及Ugi四组分反应在构建小分子化合物库的应用最为广泛。为此,我们首次利用Passerini反应和Ugi反应合成4-苯氧喹啉并α-酰氧基酰胺/α-酰氨基酰胺类衍生物。同时,在D部分和5原子连接链中分别引入不同的取代基考察对活性的影响。初步的构效关系表明,α-酰氧基酰胺/α-酰胺基酰胺作为5原子连接链有助于提高抗肿瘤活性。在系列化合物中,化合物3-14m(c-Met,IC50=2.43 n M,多靶点抑制剂)对H460、HT-29和MDA-MB-231表现出最强的抗增殖作用并优于阳性对照Foretinib。浓度依赖性和时间依赖性实验表明化合物3-14m对H460细胞的抗增殖作用具有时间和浓度依赖性。此外,分子对接研究揭示了3-14m与c-Met活性位点的结合模式。上述结果表明引入α-酰氧基酰胺作为5原子连接链的化合物3-14m具有潜在的抗肿瘤应用价值。为了进一步提高目标化合物对c-Met的选择性,设想引入高活性的药效团作为5原子连接链以提高对c-Met的选择性。因而我们设计合成了一系列4-苯氧基喹啉并磺酰脲类化合物,并对其c-Met抑制作用和细胞毒活性进行了评价。活性数据表明:与Foretinib相比,大多数目标化合物显示出中等至高效的抑酶及抗增殖活性,其中先导分子4-25x相较其它10种酪氨酸激酶对c-Met(c-Met,IC50=1.98 n M)显示出高选择性,同时对H460、MKN-45、HT-29和MDA-MB-231表现出显著的抗增殖作用。初步的构效关系表明,磺酰脲药效团的引入、末端苯环以单吸电子基团取代及喹啉7位引入亲水性碱性基团均与此类化合物的抗肿瘤活性密切相关。在随后的机制探究中,发现4-25x可以浓度依赖性方式阻滞H460细胞于G2/M期并诱导凋亡,同时4-25x亦可以浓度依赖性方式有效抑制H460细胞内c-Met的磷酸化。另外,分子对接研究表明4-25x对c-Met的高选择性与磺酰基有密切关联。为进一步寻求高靶向性、高活性且具良好理化性质的小分子c-Met抑制剂,在前两部分工作的基础上,本章尝试将磺酰基与多组分反应概念同时融入其中,进而设计合成出了一系列磺酰脒类化合物,随后对它们的c-Met抑制效力和抗增殖活性进行了评价。活性测试结果表明,大多数目标化合物对c-Met及肿瘤细胞均表现出较强的抑制活性,且此类目标化合物对A549和HT-29表现出一定的选择性。经初步的构效关系研究,化合物5-32af(c-Met,IC50=2.89 n M)为本系列中最具潜力的先导分子,具有显著的抗增殖活性。在机制探究中,发现5-32af可以浓度依赖性方式阻滞A549细胞于G2/M期并诱导凋亡,同时5-32af亦可以浓度依赖性方式有效抑制A549胞内c-Met的磷酸化。在酶谱筛选实验中,5-32af对c-Met表现出一定的选择性。另外,化合物5-32af在BALB/c小鼠体内表现出可观的安全性及良好的药代动力学性质。5-32af具备的优良“类药”性质表明磺酰脒可能是一类很有前途的药物骨架。此外,分子对接和分子动力学模拟揭示了5-32af与c-Met的结合模式。综上,体内外测试结果均表明5-32af是一种潜在的抗肿瘤候选药物,可作为选择性c-Met抑制剂进一步开发。