本试验分别做了以下探讨，并取得了预期的结果：(1)利用牛性别决定基因(SRY)和牛Y染色体特有重复序列(BRY4a、BRY1、MSRD)作为雄性特异性基因，ZFX/ZFY基因作为内部对照基因，分别进行双重PCR扩增，以便用于牛早期胚胎性别鉴定。实验结果表明，这四个引物组合建立的扩增体系均可用于性别鉴定。通过PCR反应条件的反复摸索和研究，最终确定适合生产实践的牛早期胚胎性别鉴定的基因是牛Y染色体特异性序列BRY基因。(2)改变引物浓度、模板DNA的浓度、退火温度、调整循环条件等影响PCR因素，确定适合生产实践的PCR反应体系为：反应体系25μL，10×Buffer2.5μL，dNTP 0.5μL，TaqDNA聚合酶0.5μL，ddH2O 19.5μL，ZFX/ZFY上、下游引物各0.5μL，BRY4a上、下游引物各0.2μL，模板0.6μL。反应条件：94℃预变性4min，94℃变性30s，54℃退火30s，72℃延伸1min，共28个循环，72℃延伸10min，4℃保存。(3)将目的基因连接于克隆载体pGEMR-T、转化至感受态细胞E.coli-DH5a，并进行菌落PCR鉴定及测序分析，经提交GeneBank进行核酸序列相似性搜索发现，成功克隆了荷斯坦奶牛、西门塔尔牛、甘南牦牛的BRY基因两部分片段BRY4a和BRY1。(4)序列同源性分析表明，荷斯坦奶牛、西门塔尔牛、甘南牦牛和绵羊的BRY基因的核酸序列有很高的同源性，分子在进化上均相当保守。(5)怀孕母牛的犊牛性别预测准确率为80.77％。