【摘 要】
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研究首次从池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)中克隆到Transformer 2β基因(以下简称:Hs-Tra2β),在 NCBI GeneBANK 上的基因登录号为 MK991900,其 ORF(Open reading frame)框长5
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研究首次从池蝶蚌(Hyriopsis schlegelii)中克隆到Transformer 2β基因(以下简称:Hs-Tra2β),在 NCBI GeneBANK 上的基因登录号为 MK991900,其 ORF(Open reading frame)框长53 1bp,编码176个氨基酸,同源比对显示Hs-Tra2β蛋白含有典型的RRM结构域,构建进化树发现其与太平洋牡蛎Tra2β蛋白聚为一支,说明其基因进化较高保守。利用qRT-PCR检测了Hs-Tra2β mRNA在池蝶蚌不同组织的表达情况:其mRNA在性腺、肝胰腺和肠中表达较高,说明Hs-Tra2β可能参与了调控池蝶蚌性别分化。检测Hs-Tra2β的年龄差异性表达:Hs-Tra2βmRNA在卵巢中从1-5龄表达持续上调,在5龄卵巢中表达量达到最高。在精巢中Hs-Tra2βmRNA表达从1-3龄上调,3龄时表达量最高,3-5龄回落。为进一步研究Hs-Tra2β mRNA表达是否受温度变化影响及其表达分子调控机制,qRT-PCR同时检测不同温度下Hs-Tra2β和Hs-Tra2α及下游受其潜在调控的Hs-Fem1b和Hs-Fem1c的mRNA表达特征和关联对应情况,结果显示,Hs-Tra2β在雌性性腺中,21℃培养组的转录表达显著高于其他培养组,29℃时表达量最低,而在雄性性腺中,随着温度从17℃到33℃转录组表达呈现为先轻微上调后趋于平稳;Hs-Tra2α在卵巢中的表达呈现出培养温度越高,表达量降低;Hs-Fem1b和Hs-Fem1c在卵巢中的表达则为21℃时最低,而29℃时最高。以上表明:Hs-Tra2β的mRNA表达受环境温度变化影响,且其在卵巢中的表达与Hs-Fem1b Hs-Fem1c的表达有一定的拮抗关系,表明了Hs-Tra2β可能参与池蝶蚌性别分化调控,且在雌性个体性别分化期间其可能是通过抑制下游Hs-Fem1b和Hs-Fem1c发挥促雌性化分子调控作用。
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