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旋覆花是一种传统的中草药,为菊科植物旋覆花属旋覆花(Inula japonica Thunb.)的干燥头状花序,主要分布于我国、韩国和日本。我国主产于河南、河北、江苏、浙江、新疆、东北等地。该药收载于中华人民共和国药典2010年版一部,性味咸、温,入肺、肾经,主治咳嗽消痰、胁下胀满、大腹水肿、去头目风、泄散风寒。目前,文献报道的旋覆花化学成分主要含有倍半萜、黄酮、香豆素类甾醇等化合物,具有抗炎、抗哮喘、抗肝损伤、抗肿瘤、抗氧化等多种生物活性。在前期研究表明旋覆花乙醇提取物具有抗炎抗哮喘作用,本文以阐明旋覆花活性物质为基础,拓展临床应用和新药发现为目的,开展旋覆花生物活性成分研究。本文以乙醇溶液提取、不同极性的有机溶剂萃取得到各提取部位,进一步以常压柱色谱、中压柱色谱和凝胶柱色谱分离,制备高效液相色谱纯化,从旋覆花的75%乙醇提取物中共分离得到38个化合物,以UV、IR、MS、1D NMR和2D NMR有机波谱技术和化学方法,鉴定了各化合物的结构,分别为:1β-hydroxy-3-oxo-11αH-eudesma-4(5)-en-12,8β-olide(1),11α 氢-桉烷-4-烯-12,8β-内酯-1-O-β-D-葡萄糖苷(2),4α,11α氢-桉烷-5-烯-12,8β-内酯-1-O-β-D-葡萄糖苷(3),1-oxo-4αH-eudesma-5(6),11(13)-dien-12,8β-olide(4),6α-异丁酰氧基旋覆花素(5),6α-(2-甲基丁酰氧基)旋覆花素(6),6α-(3-甲基戊酰氧基)旋覆花素(7),1β-hydroxy-8β-acetoxy-3-oxo-eudesma-4(5),11(13)-dien-12-oic acid methyl ester(8),19-O-β-D-glucopyranosyl-16α-hydroxy-17-acetoxy-ent-kauran-19-oic acid(9),ivangustin(10),1β,3α-dihydroxy-eudesma-4(5),11(13)-dien-12,8β-olide(11),(1β,3β,4β,7β,8β,11β)-1,3-dihydroxyeudesm-12,8-lactone(12),1β-羟基-土木香内酯(13),(1R,4S,5R,7R,8R,10S)-1,5-dihydroxy-eudesma-11(13)-en-12,8-olide(14),1β-hydroxy-4α,11αH-eudesma-5en-12,8β-olide(15),去乙酰旋覆花素(16),旋覆花素(17),1,6-二乙酰大花旋覆花内酯(18),6α-isobutyloxu-1-hydroxy-4αH-1,10-secoeudesma-5(10),11(13)-dien-12,8β-olide(19),6α-isovaleryloxy-1-hydroxy-4αH-1,10-secoeudesma-5(10),11(13)-dien-12,8β-olide(20),1β-羟基-8β-乙酰氧基异木香酸甲酯(21),1β-羟基-8β-乙酰氧基木香酸甲酯(22),16α,17-dihydroxy-ent-kauran-19-oic acid(23),槲皮素(24),泽兰黄酮(25),泽兰黄醇素(26),菠叶素(27),木犀草素(28),花旗松素(29),蒲公英醇乙酸酯(30),阿里二醇(31),对羟基桂皮酸(32),咖啡酸(33),咖啡酸乙酯(34),(6R,7E)9-hydroxy-4,7-megastigmadien-3-one(35),(3S,5R,6S,7E)-5,6-epoxy-3-hydroxy-7-megastigmen-9-one(36),8,9,10-三羟基百里香酚(37),二氢芥子醇(38)。化合物1～9为新化合物,化合物23、29、32、34、36、38为首次从该属植物中分离得到,化合物10、23、25～27、29、31～36、38为首次从该种植物中分离得到。本文对各单体化合物进行了抗NO、抗LTC4和抑制肥大细胞脱颗粒等抗炎活性研究。首先在非细胞毒剂量下,以Griess法检测各化合物对LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO的抑制活性。结果表明,化合物4、18～20、24和28具有确切的NO生成抑制作用,IC50值分别为3.46 μM、13.8 μM、3.11 μM、1.9 μM、26.5 μM 和 24.5 μM;进一步利用BMMC检测化合物对LTC4和肥大细胞脱颗粒释放的影响。对LTC4生成的抑制作用实验结果表明,化合物14、15、18、20、22、24～29具有较强的抑制KL诱导的肥大细胞生成LTC4的作用。另外,化合物5、24、25、28具有较强的抑制KL诱导肥大细胞脱颗粒作用。上述NO产生、白三烯生成以及肥大细胞脱颗粒三个方面的抗炎活性评价结果表明,中药旋覆花抗炎作用的主要有效成分为倍半萜类和黄酮类化学成分,其中裂环桉烷型倍半萜类(化合物18～20)、黄酮类(化合物24～29)的抗炎活性最强。