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本试验以桃砧木GF677(Prunus.amygdalus×Prunus.persica)为材料,首先通过茎段培养获得组培无菌苗,其次通过对基本培养基类型、激素种类和浓度配比、碳源和暗培养时间等一系列因素的研究,初步建立了桃砧木GF677叶片离体再生和愈伤组织诱导、保存体系。主要研究结果如下:
1、6月下旬进行GF677茎段培养,腋芽萌发率可达90.90％,且生长状况良好。GF677试管苗适宜的增殖培养基为LP基本培养基+6-BA0.75 mg/L+IBA0.3mg/L+GA30.5 mg/L,添加蔗糖30.0 g/L,琼脂6.8 g/L,每28 d左右继代一次。
2、GF677试管苗适宜的生根诱导培养基为MS基本培养基+IBA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+PG120.0 mg/L,添加蔗糖20.0 g/L,琼脂6.8 g/L。培养30 d生根率可达100％,平均每棵植株生根10.72条,平均根长3.72 cm。
3、GF677叶片再生适宜的培养基配方为LP基本培养基+6-BA4.0 mg/L+2,4-D0.2 mg/L+AgN030.5 mg/L,添加蔗糖20.0 g/L,琼脂6.0 g/L。叶片沿垂直主脉方向横切三刀,近轴端接触再生培养基,暗培养21 d后转移至光培养,再生率达13.33％。
4、采用预处理的方式获得的GF677预培养叶片较佳的再生培养基配方为SH基本培养基+6-BA3.0 mg/L+NAA0.3 mg/L+AgN030.5 mg/L,添加蔗糖20.0 g/L,琼脂6.0 g/L。暗培养21 d后转移至光培养,再生率为9.93％。
5、以GF677试管苗叶片为外植体,愈伤组织诱导较佳的培养基配方为LP基本培养基+TDZ1.0 mg/L+6-BA0.6 mg/L+2,4-D0.2 mg/L+AgNO30.5 mg/L,添加山梨醇20.0 g/L,琼脂6.0 g/L。选取继代时间为28 d左右的试管苗幼嫩叶片,暗培养21d后转移至光培养。
6、GF677愈伤组织保存的较佳的培养基配方为LP基本培养基+6-BA0.5 mg/L+2,4-D0.5 mg/L+CH0.2 g/L,添加蔗糖30.0 g/L,琼脂6.0 g/L。选取继代时间为21 d左右的愈伤组织暗培养保存。