多囊卵巢综合征(PCOS)是女性不孕常见的原因之一,也是育龄期妇女常见的一种复杂的内分泌及代谢异常所致的疾病,通常以排卵障碍或不排卵和高雄激素血症为主要特征。临床表现主要为月经周期不规律、不孕、多毛、以及痤疮。PC0S的发病机制较为复杂,研究发现这是一种多基因异常与环境因素相互作用所引起的疾病。近年来,卵巢微环境的改变成为国内外研究的热点,其中卵巢局部调节因子的功能失调被认为PCOS发病的重要环节。囊性纤维化跨膜转导因子(CFTR)是一个环磷酸腺苷依赖的氯离子通道蛋白,在维持和稳定机体局部液体微环境稳态中发挥重要作用。CFTR基因的突变可以导致其在细胞膜上转运功能障碍,有研究表明其与一些细胞凋亡和炎症相关的信号通路有关。目前已知CFTR在人的颗粒细胞中表达,是卵巢重要的局部调节因子。CFTR在PCOS大鼠模型中的表达下调。CFTR功能失调可导致囊性纤维化(CF),而纤维囊性化的病人在临床上表现为青春期延迟、无排卵、少排卵、闭经与PCOS相似。由此推测CFTR可能参与颗粒细胞的炎症与凋亡过程,参与PCOS的发病。尽管已有研究表明CFTR在女性卵巢中有表达,然而尚无CFTR在PCOS发生发展中的相关研究报道,其对卵巢功能的影响及具体机制也有待进一步研究。目的:本研究通过CFTR特异性抑制剂CFTRinh-172探讨CFTR对人源卵巢颗粒肿瘤细胞(COV434)增殖活力和凋亡等生物学特性的影响,分析CFTR在卵巢中的作用方式,并进一步探讨与PCOS发病机制的相关性,为临床治疗PCOS提供一个新的思路。方法:分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、Western Blot和qRT-PCR检测添加CFTRinh-172后COV434细胞的增殖活性及凋亡情况,检测半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)蛋白、环氧化酶-2(Cox-2)蛋白和肿瘤坏死因子(TARIL)基因的表达情况。统计结果以Mean±SEM表示,利用SPSS 22.0统计软件,经方差齐性检验后,采用One-Way ANOVA分析,以P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1.MTT法。不同浓度(10μM和50μM)的CFTRinh-172作用于COV434细胞后均至其生长活力下降(P<0.001),且随浓度的增加其生长抑制显著。CFTRinh-172处理后第三天的COV434细胞生长抑制率差异显著,抑制率与作用时间显著正相关(P<0.05)。2.Western Blot。不同浓度(1μM和 10μM)CFTRinh-172 作用 COV434 后,Caspase-3和COX-2的蛋白表达量随浓度的增加而增加。其中,Caspase-3的蛋白表达量在培养48h后明显高于培养24h后。3.qRT-PCR。添加不同浓度(1μM和 10μM)CFTRinh-172 后,COV434 中 TARIL基因的24h表达量与Control组相比呈低表达,且随着浓度的增加抑制效果更显著,有统计学意义(P<0.05)。结论:1.CFTRinh-172对COV434细胞在不同时间和一定浓度下的生长均有抑制作用,且呈剂量-效应关系。我们已知颗粒细胞增殖的减少和凋亡可能是PCOS卵泡发育异常的基础,由此我们推测CFTR通道对PCOS的发病机制具有一定相关性,有望成为未来潜在的治疗靶点。2.CFTRinh-172可促进COV434中Caspase-3蛋白、COX-2蛋白的表达。激活型Caspase-3是细胞凋亡的过程中最关键的执行分子之一,高表达提示细胞凋亡的存在。3.CFTRinh-172可抑制COV434中TARIL基因表达。CFTR功能缺失有可能降低颗粒细胞的TRAIL表达,从而导致卵巢内炎症发生,进而造成PCOS。