丁香假单孢菌和解淀粉欧文氏菌Hrp分泌系统的结构与功能研究

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该研究中,作者发现pseudomona syringae PV.tomato DC3000在hrp诱导条件下产生一种类似于纤毛(pilus)的结构,其直径为8-10nm.DC3000在丰富增减基中不产生这种pilus结构,DC3000的hrpS和hrpH突变体在hrp诱导增减基中也不产生这种pilus结构,因而表明这种pilus结构是由细菌的hrp基因所控制的,因之称为Hrp pilus.该研究通过遗传学、分子生物学及免疫化学分析证明,HrpA蛋白质是Hrp pilus的主要结构蛋白.HrpW和HrpZ是已知的另外二种分泌到上的Hrp蛋白,但该研究的免疫金标分析表明,它们不是Hrp pilus的结构蛋白.为进一步研究Hrp pilus的结构与功能,作者分别克隆 了DC3000鞭毛蛋白基因(flaA)和hrpA基因,并通过定位突变获得了DC3000的无鞭毛、 无pilus及双突变体.该项目的最终目的是培育能表达抗体基因从而个有抗性的作物新品种.通过以Pseudomona syringae的Hrp pilus和HrpA挽 疫小折鼠,作者从免疫过 的小白鼠mRNA中经仅转录及特异性PCR扩增,上前已构建了scFV表达文库,其特异性的scFV基因克隆正在进行中.
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