【摘 要】
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鼻咽癌倾向于表观遗传学疾病,鼻咽癌特异性肿瘤抑制基因的启动子区CpG岛高甲基化导致其转录表达下调甚至沉默,丧失肿瘤抑制功能,成为鼻咽癌发病的重要机制。为大规模筛选出鼻
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鼻咽癌倾向于表观遗传学疾病,鼻咽癌特异性肿瘤抑制基因的启动子区CpG岛高甲基化导致其转录表达下调甚至沉默,丧失肿瘤抑制功能,成为鼻咽癌发病的重要机制。为大规模筛选出鼻咽癌中因高甲基化而失活的肿瘤抑制基因,我们利用高通量的cDNA表达芯片技术,以甲基转移酶抑制剂联合脱乙酰基酶抑制剂处理鼻咽癌细胞株CNE2和HONE1,分别与未经处理的细胞株进行差异表达的基因的筛选。整合两张芯片处理后表达上调的基因,再以具有CpG岛为条件,初步筛选出鼻咽癌甲基化谱389个基因。挑选甲基化谱中4个基因FSTL1, MAEL, TFPI2和SPARC进行验证。利用半定量RT-PCR检测处理前后细胞中上述基因的表达改变情况。结果显示这4个基因经过5-aza-dC处理后不同程度的表达上调,为鼻咽癌候选肿瘤抑制基因。另外我们对感兴趣的基因FSTL1进行DNA甲基化的验证。发现鼻咽癌组织中FSTL1的表达水平显著低于正常鼻咽组织水平;FSTL1基因启动子区CpG岛高甲基化可在100%(6/6)的鼻咽癌细胞系和68.6%(24/35)的原发肿瘤中检测到,在正常鼻咽组织中则为非甲基化。鼻咽癌中FSTL1基因启动子区CpG岛高甲基化,这是其表达失活的直接原因。本课题研究的结果初步建立起鼻咽癌的甲基化谱,证实谱中FSTL1基因启动子CpG岛异常高甲基化导致其转录表达下调。
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