益气解毒化瘀小复方对MRL/MP狼疮小鼠趋化因子及肾纤维化影响的实验研究

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本文研究了益气解毒化瘀小复方对MRL/MP狼疮鼠的疗效,并探讨了其对MRL/MP狼疮鼠肾组织MCP-1和TGF-β1蛋白及基因表达的影响,同时对MRL/MP狼疮鼠的病变特点作以动态观测。 方法:以MRL/MP狼疮鼠为研究对象,共36只,购自上海中科院实验动物中心,SPF级饲养。按不同月龄及不同干预方法对MRL/MP狼疮鼠进行如下随机分组:二月龄组:空白组(N=6),中药组(N=6),雷公藤组(N=6);三月龄组:空白组(N=4),中药组(N=5);四月龄组:空白组(N=4),中药组(N=5),共观测治疗8周。其中对蛋白尿在实验的0周、2周、4周、6周、8周作动态观测,8周后实验结束,收集血样、肾脏、胸腺、颌下腺等组织标本进行相关检测:24h尿蛋白定量(考马斯亮蓝法);Scr、Ccr(碱性苦味酸法);抗ds-DNA抗体(ELISA);组织病理(HE染色及光镜观测);肾组织MCP-1和TGF-β1蛋白及基因表达(免疫组化和RT-PCR),等。 结果:经统计学分析,主要结果如下:24h尿蛋白定量:二月龄组中药组及雷公藤组在8周观测时点显著低于空白组,P<0.05;三、四月龄组中药组亦低于空白组,但无统计学意义;抗ds-DNA抗体:不同月龄组中药组及雷公藤组均低于空白组,但除二月龄组雷公藤组与空白组之间差异显著(P<0.05)外,余均无统计学意义;肾组织病理及免疫组化半定量分析:MRL/MP狼疮鼠肾组织病理改变主要有肾小球系膜增生,肾小管空泡变性及小管间质炎性浸润等,但无明显的纤维化改变,就病变程度而言:空白组重于中药组、雷公藤组;不同组别中药组、雷公藤组肾组织MCP-1、TGF-β1蛋白表达强度均低于空白组,其中二、三月龄组中药组、雷公藤组MCP-1蛋白表达与空白组差异显著,P<0.05或P<0.01,但不同组别彼此间肾脏TGF-β1蛋白表达均无显著差异;RT-PCR:肾组织MCP-1和TGF-β1mRNA表达情况,除二月龄组中药组、雷公藤组与空白组比较有显著性降低,余不同月龄各组间均无显著性差异。 结论:益气解毒化瘀小复方对MRL/MP狼疮鼠具备一定疗效,其可以降低MRL/MP狼疮鼠蛋白尿,抑制抗ds-DNA抗体形成,不同程度地下调肾组织MCP-1和TGF-β1mRNA及蛋白表达,正是通过这些环节的调控,益气解毒化瘀小复方可防止MRL/MP狼疮鼠进一步肾损害,避免肾纤维化和终末期肾病发生。
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