姜黄素对Hep-2细胞化疗增敏作用

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目的:喉癌是我国常见的恶性肿瘤之一,严重地威胁着人们的健康与生命。中药研究进展为肿瘤新辅助化疗提供了可能,姜黄素是从姜黄属植物的根茎提取的一种酚类色素,姜黄素对正常细胞无明显毒副作用,但可提高肿瘤细胞对化疗药的敏感性。本研究拟采用姜黄素与多西紫杉醇合用处理人喉癌Hep-2细胞,观测姜黄素抗肿瘤的化疗增敏作用,为临床提高喉癌疗效、减轻多西紫杉醇的毒副作用提供实验依据。方法:本研究选取Hep-2细胞为研究对象,分别设姜黄素:0μmol/L、5μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L五个浓度组,多西紫杉醇:0ng/ml、1ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml五个浓度组,培养0、24、48、72小时,通过MTT实验,确定最佳实验浓度。实验分为四组:空白对照组(仅加培养液)、姜黄素组(20μmol/L姜黄素处理)、多西紫杉醇组(25ng/ml多西紫杉醇处理)、混合组(20μmol/L姜黄素+25ng/ml多西紫杉醇处理)。MTT法,检测Hep-2细胞生长增殖的影响;倒置显微镜:观察Hep-2细胞形态学变化;流式细胞仪:检测Hep-2细胞凋亡;Western-blot:测定Hep-2细胞P-gp表达。结果:MTT实验结果显示:姜黄素、多西紫杉醇单用及合用均可抑制Hep-2细胞生长增殖且合用具有协同作用;倒置显微镜:姜黄素与多西紫杉醇合用组Hep-2细胞死亡细胞数目增多,但各组间细胞在形态学上无明显差异;流式细胞仪检测结果显示:姜黄素与多西紫杉醇联合用Hep-2细胞凋亡率高于其他各组;Western-blot结果表明,姜黄素与多西紫杉醇合用组Hep-2细胞P-gp的表达水平低于其他各组。结论:姜黄素及多西紫杉醇均对Hep-2细胞有生长增殖抑制作用;并诱导其凋亡;姜黄素提高了Hep-2细胞对多西紫杉醇敏感性;增强多西紫杉醇对Hep-2细胞的杀伤作用。
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