秀丽隐杆线虫DAF-16/FOXO在特定组织中对寿命和抗性的调控作用研究

来源 :厦门大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shizhongshan_2001
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进化保守的胰岛素信号通路是调控秀丽隐杆线虫发育、衰老和压力应激的重要信号通路之一。胰岛素受体DAF-2位于胰岛素信号通路的上游,它可与胰岛素结合来感受外界信号刺激,daf-2突变显著延长线虫寿命并增加其抗压性;FOXO转录因子DAF-16位于胰岛素信号通路的最下游,daf-2突变和压力条件促使它进入细胞核,进而调控靶基因表达,而daf-16突变可完全抑制daf-2突变所引起的寿命延长和抗压性。已有研究暗示功能重要的daf-16亚型daf-16b/c和daf-16d/f在不同组织中表达,并可能在功能上存在差异。为进一步确定daf-16在不同组织中的功能,本文首先构建了daf-2突变体背景上组织特异性RNA干扰系统,然后对daf-2突变体特定组织中daf-16RNA干扰后的寿命和抗性加以分析。实验结果表明:分别在表皮、肠道或体壁肌肉中去除daf-16时,仅表皮和肠道中去除daf-16会显著缩短daf-2突变体寿命、并减弱其抗压性,揭示出daf-16在不同组织中的作用不同。为了进一步研究不同组织中daf-16b/c或daf-16d/f在功能上的差异,本文对daf-16daf-2双突变体在特定组织中进行了daf-16b/c或daf-16d/f的功能拯救,并分析了拯救daf-16b/c或daf-16d/f型后对daf-16;daf-2表型的影响。实验结果表明:肠道中拯救daf-16b/c可以部分延长daf-16;daf-2寿命;咽部肌肉或者神经系统拯救daf-16d/f也可以部分延长daf-16;daf-2寿命;表皮、神经系统和体壁肌肉拯救daf-16b/c对daf-16;daf-寿命、抗性影响不明显。由此看来表皮和肠道组织中的daf-16对daf-2突变体的长寿和抗压性是必须的;单一组织、两个组织分别拯救daf-16b/c或daf-16d/并不能完全恢复daf-16;daf-2双突变的寿命和抗性。鉴于daf-16与哺乳动物FOXO的功能同源性,本文对于线虫daf-16不同亚型在不同组织中功能的研究将对认识哺乳动物中FOXO功能提供有益的帮助。
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