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早老性痴呆（Alzheimer Disease，AD）和其它多种神经退行性疾病均有神经原纤维缠结（NFT）存在于大脑，NFT由过度磷酸化的微管相关蛋白tau、神经细丝（neurofilament，NF）等组成。很多研究已证实过表达tau有抗凋亡的作用，且胞核内的去磷酸化tau对DNA有保护作用，但是关于神经细丝对细胞生存的影响还不清楚。本研究的目的是探讨外源性NFM及其细胞内的定位对细胞凋亡的影响。将中分子量的神经细丝（NFM）和人全长的tau（tau441）的质粒（EGFP-C1-NFM、EGFP-C1-tau和 HA-C1-NFM、HA-tau质粒）转染鼠成神经瘤细胞株（N2a）36 h后，用1μmol/L广谱凋亡诱导剂staurosporine（STP）处理细胞不同时间，流式结果显示，凋亡诱导后3 h、6 h、12 h和24 h，与空载质粒转染组相比，表达外源性tau组的凋亡率均明显降低（3 h，p<0.05；6 h-24 h，p<0.01），而各时间点转染NFM组与空质粒组凋亡率均无显著性差异，说明表达外源性NFM没有抗凋亡作用。通过免疫荧光结果分析两者的定位：内源性tau低表达于细胞质，而外源性tau在胞浆胞核中均有表达，内源性NFM表达极低，几乎不可见，外源性的NFM主要定位在N2a细胞浆中。进一步分离胞浆蛋白和胞核蛋白，通过免疫印迹技术检测以上两种外源性蛋白在细胞内的表达，结果为内源性tau表达极低，转染tau质粒后外源性tau在胞核和胞浆内均含有。与tau在细胞内的定位不同，NFM基本不表达于胞核。为了探讨是否NFM表达在胞浆是其不抑制细胞凋亡的原因或者原因之一，构建了带核定位序列（nuclear location signal，NLS）的NFM质粒：EGFP-C1-NLS-NFM和HA-C1-NLS-NFM质粒及其相应空载体，免疫荧光结果显示，带核定位序列的EGFP-C1-NLS-NFM或者HA-C1-NLS-NFM质粒表达的NFM可以部分入核。STP处理细胞后，免疫荧光结果显示，带核定位序列的质粒转染后转染阳性细胞基本为Cleaved Caspase-3（作为凋亡标志物）阴性，而EGFP-C1-NFM质粒转染的细胞大部分均为Cleaved Caspase-3阳性，表明外源性NFM入核后可以对抗凋亡诱导剂所致的细胞凋亡。的研究结果表明，NFM不抑制细胞凋亡可能与其不进入细胞核有关，其入核后抗凋亡作用的机制有待进一步研究。此结果为进一步了解神经退行性疾病中细胞骨架成分对细胞生存的影响提供了新的认识。