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目的:1,探讨凋亡相关基因Caspases-9和Caspases-3在实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠胸腺中的表达及其意义。2,研究鼻粘膜耐受对EAMG临床及胸腺Caspases-9和Caspases-3表达的影响,研究凋亡机制在MG免疫耐受机制中的作用,为鼻粘膜免疫耐受治疗MG提供理论依据。方法:人工合成的鼠源肽段Rα97-116与完全氟氏佐剂(CFA)充分乳化后四点皮下注入6-8周龄雌性Lewis大鼠,在第30、60天强化注射与不完全氟氏佐剂(IFA)充分混合后的同等量肽段构建EAMG大鼠模型。正常对照组同期注入等量的磷酸盐缓冲液(PBS)。通过称量实验大鼠体重,进行Lennon临床评分,低频重复神经电刺激(RNES)观察电衰减反应,ELISA法检测血浆中AchR-Ab(IgG)滴度明确EAMG大鼠是否成模。EAMG模型组和鼻粘膜耐受组所有成模大鼠,于第71-80天在两组经鼻腔分别滴注PBS液和Rα97-116(V108A)肽段。耐受日起每日记录体重变化,隔日记录两组临床评分,第81天结束观察,取大鼠胸腺运用TUNNEL法计数凋亡细胞数,并采用免疫组化技术(IHC)观察Caspases-9和Caspases-3在胸腺的表达情况,ELISA测定血浆中AchR-Ab(IgG)含量。结果:1,造模Lewis大鼠中73.3%Lennon临床评分>1分,3Hz、5 Hz低频重复神经电刺激电衰减反应D5波幅比D1波幅递减>10%,血浆中AchR-Ab IgG滴度与正常对照组血清比值>2.1。验证EAMG模型成模率达73.3%。2,经Rα97-116(V108A)鼻粘膜耐受治疗10天后,耐受组大鼠体重较模型组鼠明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。3,耐受治疗10天后,耐受组、模型组两组平均Lennon临床评分分别为1.62±0.39、2.12±0.06(P<0.05)。4,Rα97-116(V108A)鼻粘膜耐受治疗10天后,耐受组AchR-Ab IgG(0.98±0.17)含量明显下降,与模型组(1.27±0.22)比较有统计学意义(P<0.05)。5,模型组大鼠胸腺细胞凋亡细胞数较正常组显著减少(P<0.05),耐受组大鼠胸腺细胞凋亡细胞数则较模型组明显增加(P<0.05),而与正常组相比较无统计学意义(p>0.05)。6,模型组大鼠胸腺细胞Caspases-9和Caspases-3分子表达较正常组显著下调(P<0.05)。7,耐受组大鼠胸腺细胞Caspases-9和Caspases-3分子表达较EAMG模型组显著增加(P<0.05)而与正常组相比较,差异无显著性(p>0.05)。结论:1,胸腺细胞的凋亡障碍可能是EAMG的发病机制之一;Caspases-9和Caspases-3蛋白的表达在介导EAMG大鼠胸腺细胞凋亡障碍的过程中可能具有重要作用。2, Rα97-116(V108A)鼻粘膜耐受能明显改善EAMG大鼠的肌无力症状,缓解胸腺细胞凋亡的异常,其作用机制可能与胸腺自身反应性淋巴细胞的凋亡有关。