负载黄连素的壳聚糖温敏水凝胶的制备及体外抑菌研究

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【目的】制备含黄连素(Berberine,BBR)的壳聚糖(chitosan,CS)/β-甘油磷酸钠(β-glycerophosphate,β-GP)温敏水凝胶,表征其理化性质,并对其生物相容性,体外抑菌效果进行评价,以评估其在慢性牙周炎治疗中的潜在作用。【方法】通过物理交联法制备CS/β-GP温敏水凝胶,将BBR加至CS/β-GP温敏水凝胶体系中,根据载药量不同,制备BBR浓度分别是25μg·m L-1、50μg·m L-1、100μg·m L-1的BBR/CS/β-GP温敏水凝胶,表征各组凝胶的p H、在37℃的成胶时间、内部结构、流变性能和体外药物释放效果。通过细胞记数试剂盒(Cell counting kit,CCK-8)测定各组水凝胶对牙周膜细胞的增殖影响评估细胞相容性。通过牛津杯法分析各组水凝胶对牙周致病菌牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)ATTCC33277、具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,F.nucleatum)ATCC25586的体外抑菌作用。【结果】各组凝胶在4℃均有良好的可注射性,在体温左右均可以完成相变。CS/β-GP的相变温度在37.26℃,各组水凝胶在37℃下3min内均可顺利完成凝胶化转变,p H在6.5~7.4之间,符合人生理范围,凝胶电镜结果呈现出相互通联的三维网络结构。BBR/CS/β-GP水凝胶体外可以持续缓慢释放BBR,24h累计释放率可达70%~80%;各组凝胶与牙周膜细胞共培养1、3、5 d未见明显细胞毒性;各组水凝胶对牙周致病菌P.gingivalis ATTCC33277和F.nucleatum ATCC25586的生长均有抑制作用,其中100μg·m L-1BBR/CS/β-GP组水凝胶与CS/β-GP组水凝胶的抑菌结果具有显著性差异(P<0.05)。【结论】本实验制备的100μg·m L-1BBR/CS/β-GP温敏水凝胶具有稳定的理化性质及流变学特性,良好的生物相容性,且对牙周致病菌具有明确的抑菌作用,可以作为慢性牙周炎局部用药治疗的候选制剂。
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