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凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative staphylococci,CNS)一直被认为是人体皮肤、黏膜的共栖菌,没有致病性。近年来随着侵袭性诊疗操作的增加以及人工器官材料使用的日益广泛,由CNS引起的感染逐渐上升,约占医院血液感染的25%。其中溶血葡萄球菌分离率明显增加,且对甲氧西林耐药溶血葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus haemolyticus,MRSH)达到80%以上,明显高于其它CNS。目前糖肽类抗生素是治疗MRSH感染唯一肯定有效的药物,这类抗生素的大量使用已导致了糖肽类抗生素耐药溶血葡萄球菌的出现。所以有必要对糖肽类抗生素的使用进行监控。特别是多重耐药MRSH的流行,如得不到及时控制,其致死率可高达18.8%~57%。因此早期发现MRSH感染的流行极为重要。 本研究收集了我院2002年4月~2003年4月临床标本分离的溶血葡萄球菌133株,包括门诊病人分离菌株39株及住院病人分离菌株94株。采用微量肉汤稀释法测定溶血葡萄球菌对16种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);PCR法检测mecA基因,并与普通药敏试验比较,对不相符的菌株分别进行抑制、诱导试验,同时对PCR产物进行克隆测序;采用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)技术对90株住院病人分离的MRSH作同源性分析。 结果显示133株溶血葡萄球菌对利奈唑胺、万古霉素、去甲万古霉素没有耐药浙江大学2004届硕士学位论文株,对替考拉宁的耐药率为6.0%;对阿米卡星、异帕米星、米诺环素、利福平、氟氧头抱的耐药性较低,耐药率<20%;对青霉素G、苯哇西林的耐药率>90%。除米诺环素外,住院病人分离菌株的耐药率高于门诊病人分离菌株;PCR检测mecA基因阳性率为9023%,产物经克隆测序证实为mecA基因的特异性产物;对2株mecA基因阳性而苯哇西林MIC毛0.25林留ml进行诱导试验后Mlc)0.5协g/ml;对3株mocA基因阴性而MIC)0.5拼g/ml进行抑制试验后其MIC值下降8倍以上;90株MRsH的PFGE图谱有25型(A一Y),A型36株,A型又有Al一AS五个亚型,以Al亚型为主;2002年4月一2002年8月和2002年12月一2003年3月发生了Al亚型株流行;2002年8月和2002年10月一2003年1月发生了A3亚型株流行;流行株在住院病人、各病房之间传播;血培养阳性的12例患者中6例有感染的临床表现,存在菌血症,引起菌血症的6株菌株脉冲场凝胶电泳分型均为A型。以上研究表明:溶血葡萄球菌对大多数抗菌药物均有较高的耐药性,对糖肤类抗生素的敏感性也在下降,需引起临床重视。2.根据mecA基因的检测结果,判定是否为MRSH菌株更为可靠。同源性高的菌株引起菌血症的可能性大。4.MRSH己成为医院感染的重要病原菌,在我院可能存在MRSH的局部流行,可通过多种途径造成感染,加强消毒隔离措施对防治MRSH的流行有重要意义。