论文部分内容阅读
目的放射性肺损伤是临床胸部肿瘤放疗,骨髓移植预处理,平时核辐射事故及战时核辐射后严重并发症之一,目前临床上没有一种确切有效的治疗方法。如何有效防治放射性肺损伤特别是战时核辐射大批伤员的救治目前是国内外医学界研究的一个热点。国内外许多研究者发现放射性肺损伤的发生和发展是一个有多种细胞参与及由多种细胞因子调控的复杂过程。本研究通过观察乌司他丁及重组人肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(益赛普)对SD大鼠由直线加速器造成的放射性肺损伤的防治作用,以找到一种防治放射性间质性肺炎和放射性肺间质纤维化的新途径。本研究内容共分为三部分:1.直线加速器诱发大鼠放射性肺损伤模型的建立;2.高剂量乌司他丁对SD放射性肺损伤的防护作用;3.注射用重组人肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(益赛普)对大鼠放射性肺损伤中TNF-α的影响。此项研究,无论对于军事医学或民用医学都具有重要的理论和实用价值。方法1. SD大鼠经戊巴比妥40 mg/kg腹腔麻醉后,以自制的装置固定大鼠,胸部覆以23 mm厚蜡块以调整剂量分布,铅屏蔽头部与腹部行直线加速器全胸部照射,单次剂量为25Gy(剂量率为2.5Gy/min),源靶距1m,照射野4.5cm×4.5cm。2.乌司他丁治疗实验,随机分为单纯照射组(R组,60只),预处理高剂量组(P1,45只),预处理低剂量组(P2组,45只),后处理高剂量组(A1组,45只),后处理低剂量组(A2组,45只)。预处理高剂量组与低剂量组于照射前3天开始分别以乌司他丁400 000 U、200 000 U/kg体重腹腔注射,而后每天相同剂量静注,共计7d;后处理高剂量组与低剂量组于照射当天开始分别予以乌司他丁400 000 U、200 000 U/kg体质量腹腔注射,共计7d;单纯照射组于照射当天开始腹腔静注同等体积的生理盐水。3.益赛普治疗实验,大鼠随机分为单纯照射组(R组)、正常对照组(C组)、益赛普治疗组(Y组),治疗组SD大鼠于照射当日腹腔注射益赛普按5mg/kg体重,照射后第4天注射相同剂量,共计2次;对照组,照射组腹腔注射同等体积的生理盐水。4.照射后观察各组SD大鼠一般情况,并记录各组大鼠死亡率;抽取各组大鼠血清、肺泡灌洗液保存,待检测血液中层粘连蛋白、羟脯氨酸、IL-6、TNF-α、TGF-β1水平;取病理组织切片行HE、Masson染色,观察肺组织损伤程度及纤维化水平;取部分肺组织切片后免疫组化方法待检测TGF-β和TNF-α;提取部分肺组织蛋白用Western blot分析TNF-α和TGF-β1。结果1.照射后,各组SD大鼠根据肺部病理组织显示都产生不同程度的放射性损伤,同时血清、BLAF和肺组织中TGF-β1、IL-6和TNF-α水平逐渐增高,并与肺损伤严重程度呈正相关,单纯照射组尤为明显,提示细胞因子IL-6、TNF-α、TGF-β1在放射性肺损伤中发挥重要作用;2.大鼠经乌司他丁处理后,TGF-β1、IL-6、TNF-α水平和放射性肺损伤严重程度及放射性肺纤维化程度都较单纯照射组明显降低,说明乌司他丁可以通过抑制TGF-β1、IL-6和TNF-α从而有效地防治放射性肺损伤;3.照射后,预处理高剂量乌司他丁组较其他处理组能更有效地抑制TGF-β1、IL-6、TNF-α水平,同时肺损伤严重程度也亦较轻。24周后预处理高剂量组大鼠LN和Hyp水平较其他处理组明显降低。4.照射后益赛普处理组SD大鼠血清及肺组织TNF-α和IL-6表达水平较照射组明显降低。结论乌司他丁尤其是预处理高剂量的乌司他丁和益赛普能明显地减弱照射后大鼠放射性肺损伤及纤维化程度,为放射性肺损伤的防治提供了新的思路。