小麦纹枯病和茎基腐病病原菌组成及致病力分析

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小麦纹枯病是我国北纬33度地区的重要病害,为明确其病原菌的组成和致病力,对分离自江苏、安徽、河南、湖北4省的157株丝核菌,通过Hoechst33258荧光染色法进行细胞核数量观测,利用菌丝融合的方法测定其所属融合群,并测定了其中111株丝核菌菌株对3个小麦品种(C112633、陕229、扬麦158)苗期的致病力。结果表明,在供试菌株中,150株为双核丝核菌,占95.54%,都属于AG-D融合群。7株为多核丝核菌,占4.46%,其中3株属于AG-1-IB融合群,3株属于AG11融合群,1株属于AG5融合群。供试菌株的致病力存在明显差异,双核丝核菌的Rhizoctonia cerealis为优势致病菌,其致病力显著高于立枯丝核菌Rhizoctonia solani, AG-D融合群中两种不同融合频率的菌株致病力无明显差异。不同地区的菌株间致病力无明显差异,菌株对3个小麦品种的致病力有显著差异,对C112633致病力最强,对陕229致病力最弱,对扬麦158的致病力居中。小麦茎基腐病害在早期用肉眼与典型小麦纹枯病引起的症状较难区分,为明确其病原菌的组成,2008-2009年春,从江苏、安徽、河南、湖北、河北和四川6省48个县市的65个采集点分离到了110株菌,根据其菌落形态和培养性状,以及rDNA-ITS序列的比对结果,可将这些病原菌划分为4种,分别为小麦根腐离蠕孢(Bipolaris sorokiniana)、镰孢菌(Fusarium spp.)、雪霉叶枯病菌(Microdochium nivale)和附球孢菌(Epicoccum spp.);4种病原菌的供试菌株之间的致病力存在明显差异,其中以小麦根腐离蠕孢发病率和致病力最强,其次是镰孢菌,雪腐镰刀病菌和附球孢菌则相对较弱;并对这4种病原菌进行了重新分离,重新分的率结果:小麦根腐离蠕孢为78%,镰孢菌为50%,雪腐镰刀病菌为22%,附球孢菌为5%。为了研究小麦纹枯病菌的遗传多样性,运用在R. solani AG-1IA和AG-3融合群的相关SSR引物扩增小麦纹枯病菌菌株R0301,结果表明其不能进行有效的PCR扩增;因此本研究采用ISSR-PCR的方法对小麦纹枯病菌的SSR引物开发进行了初步的开发探索,选取了(AC)10、(AG)10、(AT)10、(GTG)6,(GCT)55对ISSR引物对小麦纹枯病菌菌株R0301进行扩增,结果表明,只有以(AG)10为引物的PCR产物克隆片段,设计出一端SSR引物27对,获得了一对SSR引物,用该对引物对12株小麦纹枯病菌菌株进行聚丙烯酰胺凝胶检测,结果表明,能够得到300-500bp之间的多态性条带。
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