论文部分内容阅读
二氨基嘧啶氧化物（Kopexil）和吡咯烷基二氨基嘧啶氧化物（Kopyrrol）是有应用前景的防脱生发化学物质,但其透皮吸收困难,且水溶性差,难以添加到在防脱生发产品中。活性肽生物素三肽-1（BT1P）可促进胶原蛋白合成,加固毛囊,防止脱发;肉豆蔻酰5肽-17（MP17P）可促进角蛋白合成,促进头发生长。活性肽相较于化学物质具有作用机制明确、微量高效、安全性好等优点。但是活性肽稳定性差,透皮吸收困难,且活性肽功效单一,需将不同作用机制的活性肽复合使用。本文分别构建了载有Kopexil和Kopyrrol的纳米脂质体（Kopexil/Kopyrrol-LPs）和载Kopexil、BT1P和MP17P的纳米脂质体（Kopexil/BT1P/MP17P-LPs）,以实现不同作用机制防脱生发活性成分的透皮共输送,增强其防脱生发功效。对Kopexil/Kopyrrol-LPs和Kopexil/BT1P/MP17P-LPs的理化性质进行表征,开展了Kopexil/Kopyrrol-LPs体外透皮性能研究和细胞功效评价,模型动物在体评价了Kopexil/Kopyrrol-LPs和Kopexil/BT1P/MP17P-LPs防脱生发功效。本文开展的主要工作如下:（1）采用高压均质技术制备载有防脱生发活性物Kopexil和Kopyrrol的纳米脂质体Kopexil/Kopyrrol-LPs,其平均粒径为（81.2±1.3）nm,多分散系数PDI为（0.104±0.006）,Zeta电位为（-15.6±0.6）m V。纳米脂质体中Kopexil的载药量和包封率分别为22.1%和93.8%,Kopyrrol的载药量和包封率为11.0%和94.6%。体外释放行为研究表明,Kopexil/Kopyrrol-LPs中Kopexil和Kopyrrol呈明显的缓释行为。稳定性考察结果显示,Kopexil/Kopyrrol-LPs在3个月内粒径、PDI、Zeta电位、包封率均无明显变化。（2）采用Franz扩散池法研究Kopexil/Kopyrrol-LPs的体外透皮性能,其Kopexil的累积皮肤渗透量和滞留量分别为95.66和7.23μg/cm2,Kopyrrol的累积皮肤渗透量和滞留量分别为40.48和6.07μg/cm2。Kopexil/Kopyrrol-LPs中Kopexil和Kopyrrol的24 h皮肤滞留量较游离活性物提升约1.8和2.2倍。细胞安全性实验结果表明,脂质体包载可明显降低Kopexil/Kopyrrol的细胞毒性和明显提升其对氧化损伤细胞的保护作用。比较连续给药21天后雄激素脱发模型小鼠背部毛发生长情况以及皮肤组织切片,结果显示Kopexil/Kopyrrol-LPs组小鼠生发速度以及毛囊数量均显著高于游离活性物组。（3）采用高压均质技术制备载有活性肽BT1P、MP17P及Kopexil的纳米脂质体Kopexil/BT1P/MP17P-LPs,其平均粒径为（57.59±0.48）nm,PDI为（0.120±0.005）,Zeta电位为（-33.2±2.2）m V。纳米脂质体中Kopexil的载药量和包封率分别为3.5%和97.7%,BT1P的载药量和包封率分别为0.2%和92.1%,MP17P的载药量和包封率分别为0.2%和99.7%。Kopexil/BT1P/MP17P-LPs在体外表现出明显的缓释行为。Kopexil/BT1P/MP17P-LPs稳定性考察结果表明,三个月内其粒径、PDI、Zeta电位和包封率均无明显变化。（4）比较连续给药28天后雄激素脱发模型小鼠背部毛发生长情况以及皮肤组织切片,结果显示Kopexil/BT1P/MP17P-LPs组小鼠生发速度、皮肤胶原纤维排布紧实程度、毛囊数量均显著高于游离活性物组。