荧光—磁共振双模态探针fUSPIO@BSA-CD133mAb对CD133+胶质瘤干细胞靶向成像的体外实验研究

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tina_lh
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目的:检测荧光-磁共振双模态纳米探针fUSPIO@BSA-CD133mAb的细胞毒性,验证CD133+胶质瘤干细胞能否被其特异性、高效性标记,以及标记后能否被光学成像及磁共振检出。方法:用碳二亚胺(EDC)化学共价偶联方法连接CD133单克隆抗体与胎牛血清白蛋白包覆的荧光超顺磁性Fe3O4磁性纳米粒子(fUSPIO@BSA),制备荧光-磁共振双模态探针(fUSPIO@BSA-CD133mAb),并对复合物进行表征测定;等离子体光谱分析法(ICP―AEC)来标定fUSPIO@BSA中铁的含量;MTT比色法测定fUSPIO@BSA-CD133mAb对CD133阳性的胶质瘤干细胞株SU2的细胞增殖的抑制作用;3.0T磁共振扫描仪检测fUSPIO@BSA-CD133mAb、fUSPIO@BSA孵育SU2细胞后2h后MRI T2信号强度变化;在激光扫描共聚焦显微镜下采用cy-5参数观察fUSPIO@BSA-CD133mAb孵育SU2细胞30min的光学显像能力。结果:透射电镜下,合成的fUSPIO@BSA-CD133mAb显示均一形态,颗粒多呈类圆形,粒径均一,大约8nm,其水合动力学粒径约25nm,呈单分散,胶体稳定性好;等离子体光谱分析法测得fUSPIO@BSA-CD133mAb中铁的浓度为30.2mmol/L;MTT比色法显示fUSPIO@BSA-CD133mAb毒性小,对SU2细胞株增殖的影响小;3.0T磁共振显示fUSPIO@BSA-CD133mAb孵育细胞2h后T2信号强度(91.6±4.278)明显低于fUSPIO@BSA组(302.4±6.986)及对照组(396.8±6.979),三组SU2细胞T2信号值差别有统计学意义(P<0.001);在激光扫描共聚焦显微镜下,30min时fUSPIO@BSA-CD133mAb与SU2细胞壁靶向结合,发出环形红色荧光,fUSPIO@BSA被胶质瘤干细胞吞噬。结论:①fUSPIO@BSA-CD133mAb无明显细胞毒性,能与CD133+胶质瘤干细胞发生特异性、高效结合,具有靶向性;②借助fUSPIO@BSA-CD133mAb探针能在MRI和激光共聚焦光学显微镜下有效地识别CD133+胶质瘤干细胞;③作为一种新型纳米材料在生物领域具有广泛的前景,其不仅可以做为磁共振靶向造影剂用于肿瘤的诊断,还可以对肿瘤的靶向治疗、“定点清除”提供新策略。
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