目的:建立从人工培养的鼠疫菌中提取纤溶酶原激活因子（Pla）的方法，以及建立纯化Pla蛋白的方案，为今后制备单克隆抗体奠定基础。 方法:（1）用超声破碎、盐洗脱、尿素提取与硫酸铵盐析相结合的方法尝试Pla蛋白的提取。（2）进行了磷酸盐缓冲生理盐水（PBS）、Tris—HCl缓冲生理盐水（TBS）两种缓冲系统的各种pH对比，寻找Pla蛋白适宜的缓冲液来改善Pla蛋白可溶性。（3）用高效液相色谱分离纯化Pla蛋白，优化离子交换、凝胶过滤，并将两种层析组合。（4）用制备电泳法纯化Pla蛋白，用距离测量的方式来定位Pla三条带的位置。（5）用十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）对提取或纯化的蛋白的组成进行分析，结合Gel—pro Analyzer4.5凝胶图像专业分析软件计算蛋白分子量，并用纤溶平板检测纤溶酶原激活剂活性。 结果:（1）鼠疫菌超声破碎上清50—60%饱和硫酸铵沉淀和尿素的菌粉浸渍上清液（去除尿素）0—10%饱和硫酸铵沉淀获得的蛋白有分子量约31、35、37kDa的三条带，并检测到纤溶酶原激活剂的酶活性；盐洗脱法获得的饱和硫酸铵沉淀段均没有检测到酶活性。（2）在pH9.5的TBS中，Pla蛋白的溶解性最好。（3）用离子交换、凝胶过滤两步层析纯化的Pla蛋白主要由分子量约31、35、37kDa的三条蛋白带组成，占到蛋白总量的80%以上，并检测到酶活性。（4）用制备电泳法纯化的Pla蛋白主要由分子量约31、35、37kDa的三条带组成，条带所在位置还有其它一些低浓度蛋白的存在，未检测到酶活性。 结论:（1）用超声破碎法和尿素法可以提取到Pla蛋白。（2）Pla蛋白经液相色谱的离子交换和凝胶过滤两步层析可以达到基本纯化。（3）制备电泳法可以实现Pla蛋白的基本纯化。（4）初步认为，在Pla提取物中分子量约37、35、31 kDa的蛋白条带就是α—Pla、β—Pla、γ—Pla。