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邻苯二甲酸酯（PhthalicAcidEsters，简称PAEs，别名酞酸酯）是一类化合物的总称，主要作为塑料改性添加剂在塑料、油漆、涂料、印染、农药、化妆品、香料等的生产中具有广泛的应用。由于PAEs与塑料基质之间不形成化学共价键，而是以氢键和范德华力连接，所以在塑料制品、涂料等的生产和使用过程中，PAEs可释放入环境中，因此在大气、水体、土壤中广泛存在。近年来研究表明，PAEs类化合物具有类雌激素样活性，已经将其归类于环境激素（又称内分泌干扰物），它能对生物体及其后代的生殖发育相关的激素代谢过程产生影响。水体中PAEs化合物会被鱼类等水生动物所富集，不但会引起鱼类繁殖障碍，并且随着食物链的迁移可能对人类健康产生重要影响。本课题采用RP-HPLC、GC、LC-MS/MS分析方法，选取以DMP、DEP、DBP、BBP和DEHP为代表的PAEs类化合物为研究对象，开展其在鱼体内的代谢动力学和残留研究，为PAEs类化合物的水生动物毒理学研究提供理论依据，并且为水产品安全提供技术支持。一、建立DMP和DEP在鱼体内残留的灵敏、准确HPLC和GC检测方法血浆样品经液—液萃取,组织样品经液—液萃取和固相小柱净化后，以乙腈:水=40:60（V:V）为流动相，流速1.0mL/min，采用SHIMADZUODS柱（150mm×4.6mm；id，5μm）色谱柱分离。结果显示在标准曲线线性范围内，线性关系良好（r＞0.99），定量限为0.05μg·mL-1，检出限为0.01μg·mL-1，回收率85%以上，日内变异系数和日间变异系数均低于12%。草鱼血浆、肝胰脏匀浆、小肠匀浆以及草鱼肝细胞培养基样品经液—液萃取后，采用Agilent689气相色谱仪，氢火焰离子化检测器（FID），毛细管柱为HP-5色谱柱（30m×0.25mm；id，0.25μm）进行检测。定量限为1.25μg·mL-1，回收率85%以上，日内变异系数和日间变异系数均低于10%。二、PAEs类化合物在鱼体内代谢动力学和残留比较以DMP为研究对象，分别按20mg·kg-1经口给予罗非鱼（Oreochromisniloticus×O.aureus）和乌鳢（OphiocephalusargusCanto）DMP油溶液后，于不同时间点采集肌肉、血浆、脑、皮肤、心肌等组织，按照上述方法处理后，利用RP-HPLC方法对其中的DMP的含量进行测定。利用代谢动力学软件计算代谢动力学参数，结果表明DMP在乌鳢体内吸收和分布较快，消除缓慢；而在罗非鱼体内吸收、分布和消除均较乌鳢快。通过上述研究结果表明，PAEs类化合物在不同种类鱼体内代谢动力学和残留差异显著，说明鱼的种类对PAEs类化合物对体内代谢和残留具有显著影响。按20mg·kg-1经口给予罗非鱼DEP油溶液，然后于不同时间点采集肌肉、血浆、脑、心肌等组织，利用RP-HPLC方法对其中含量进行测定。计算代谢动力学和残留规律，与DMP相比，DEP在罗非鱼体内吸收、分布和代谢均较快，说明不同结构的PAEs类化合物在鱼体内代谢动力学和残留规律差异较大。对罗非鱼口灌DMP溶液后，分别置于不同水温条件下（18±2℃和28±2℃），不同时间采集肌肉、血浆、脑、心肌等组织，处理后，采用以上方法对其中的DMP的含量进行测定，根据所测DMP浓度—时间曲线，利用代谢动力学软件计算动力学参数。结果表明不同水温下DMP在罗非鱼体内代谢动力学和残留规律差异较显著。高温下罗非鱼灌服DMP后比低温下体内浓度高、吸收速率快。同时两种水温下灌服后360h，肌肉、皮肤、脑和心肌中均能检测到DMP的残留，但通过不同水温下代谢动力学和残留的比较研究显示水温对DMP在罗非鱼体内的吸收、分布和消除具有影响显著。三、PAEs类化合物在鱼体内、体外代谢产物的鉴定及代谢机制的研究以草鱼（Ctenopharyngodon idellus）为研究对象，取空白的草鱼血清、肝胰脏匀浆液、小肠匀浆液及肝细胞培养液，向其中加入一定浓度的DEP、DBP、BBP和DEHP混合溶液，30℃温浴。一定时间后停止反应，样品经处理后采用GC检测剩余浓度、LC-MS/MS法鉴定其代谢产物。通过对草鱼血浆、肝匀浆液、小肠匀浆液以及肝细胞培养液中代谢产物的鉴定。结果显示DEP、DBP、BBP和DEHP在草鱼肝细胞中未见明显代谢，但在草鱼血清、肝胰脏匀浆液和小肠匀浆液中均不同程度的代谢，其中血清代谢较迅速，其主要代谢产物为相应单酯类化合物，由此说明邻苯二甲酸酯类在草鱼脏器中主要被组织水解酶所水解，血液和小肠是此类化合物经鳃和口染毒的第一代谢转化场所。经口给予草鱼BBP和DBP混合油溶液，收集尿液，检测体内代谢产物，结果表明PAEs类化合物在体内水解后的单酯类化合物在体内II相代谢结合酶作用下，与内源性β-D-葡萄糖醛酸结合，生成葡萄糖醛酸结合物，进而被排出体外。综上所述，本研究选取PAEs类化合物（DEP、DMP、DBP、BBP、DEHP）为主要研究对象，建立多残留的HPLC、GC检测技术，定量研究PAEs类化合物在鱼的组织和器官中的浓度变化，阐明其在鱼体内的代谢动力学学特征和规律，探讨PAEs类化合物的代谢机制和代谢途径，并阐明了PAEs类化合物在鱼可食性组织中的消除规律。