【摘 要】
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目的:制备猪小肠粘膜下层(SIS),将其作为组织工程韧带的支架材料,应用同基双功能交联剂SS-PEG3400-SS与重组人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)进行共价偶联,并随后与SIS进行共价交联
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目的:制备猪小肠粘膜下层(SIS),将其作为组织工程韧带的支架材料,应用同基双功能交联剂SS-PEG3400-SS与重组人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)进行共价偶联,并随后与SIS进行共价交联反应,以研究经过共价偶联固化了BMP-2的SIS在缓慢降解的同时,是否可以随着其降解而长时间自发释放BMP-2,从而持续刺激小鼠胚胎成骨细胞株(MC3T3-E1)向成骨细胞定向分化。方法:将BMP-2与同基双功能交联剂SS-PEG3400-SS进行共价交联,然后将交联后的产物与制备的SIS进行共价偶联,从而间接将BMP-2固化在SIS上。用透射电镜对交联后的SIS进行形态学观察,并评估MC3T3-E1细胞在与多种不同SIS上的增殖及定向分化情况。同时比较与BMP-2共价偶联后的SIS与未与BMP-2共价偶联的SIS上钙结节的数量及碱性磷酸酶活力值,结果采用SPSS11.0软件进行统计学分析。结果:与未修饰的BMP-2相比,共价修饰后的BMP-2仍具有生物活性。通过将交联剂SS-PEG3400-SS与主要成分为胶原的SIS进行交联,可减慢SIS在体外的降解速度,并且共价交联的BMP-2可随着SIS的降解而长时间释放,从而能持续刺激MC3T3-E1细胞向成骨方向分化。结论:BMP-2通过同基双功能交联剂SS-PEG3400-SS与SIS共价偶联。共价偶联了BMP-2的SIS能更好刺激与其复合培养的MC3T3-E1细胞向成骨方向定向分化。
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