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目的第一部分：探讨吸烟和被动吸烟者体内循环内皮细胞(CECs)的变化,考察炎症在微血管损伤中的作用。第二部分：采用香烟提取物(CSE)在体外干预内皮细胞,研究香烟烟雾损伤人微血管的分子机制。方法第一部分：募集24对健康夫妇作为志愿者检测外周血CECs,其中的12对夫妇由主动吸烟的丈夫和不吸烟的妻子组成,后者被认为是被动吸烟者。另外的12对均不吸烟的夫妇为年龄匹配的对照组。用流式细胞仪检测CD45lowCD133-CD146+的CECs。用ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6 (IL-6)、C-反应蛋白(CRP)、假性血友病因子(vWF)、可溶性E-selectin (sE-selectin)、可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)和可溶性血栓调节蛋白(sTM)。第二部分：MTT法检测不同浓度CSE对HUVECs增殖的影响。Transwell系统检测HUVECs单层通透性。“划痕法”检测HUVECs的迁移。毛细管样成管实验检测HUVECs的血管新生。免疫荧光染色occludin、claudin-5和ZO-1蛋白观察内皮屏障的改变。Western blot检测occludi、claudin-5、ZO-1和NF-κB p65蛋白表达。结果第一部分：CECs水平在男性主动吸烟者显著高于男性不吸烟的对照组(365-3528个/mL、中位数1078个/mL versus143-1827个/mL、中位数536个/mL,p<0.05),在女性被动吸烟者显著高于女性不吸烟的对照组(261-3673个／mL、中位数1597个/mL versus 69-1834个/mL、中位数455个/mL,p<0.01)。血浆TNF-α、IL-6、CRP、vWF、sE-selectin和sTM水平在男性主动吸烟者显著高于男性不吸烟的对照组(p<0.05或p<0.01),而在女性被动吸烟者显著高于女性不吸烟的对照组(p<0.05或p<0.01)。与男性不吸烟的对照组相比,血浆sICAM-1水平在男性吸烟者中显著升高(p<0.05)。第二部分：10%CSE不会对HUVECs (?)舌性造成明显影响。与对照组相比,CSE干预可显著增加内皮间通透性。以15d-PGJ2(10μM)预处理HUVEC单层可有效抑制CSE诱导的通透性增加。与对照组相比,CSE显著抑制HUVECs迁移,使单个视野划痕内细胞数由629±28降低至364±17(P<0.01),15d-PGJ2干预可使细胞数回升至546±20(P<0.01)。CSE抑制HUVECs血管新生,15d-PGJ2可逆转CSE对HUVECs血管新生的抑制。免疫荧光和Western blot分析结果显示15d-PGJ2可减轻CSE介导的内皮紧密连接蛋白occludin、claudin-5和ZO-1表达的下调。15d-PGJ2可降低CSE诱导的NF-κB激活。结论第一部分：主动和被动吸烟与CECs升高及炎症诱导内皮损伤的标志物水平上调有关；主动和被动吸烟者体内存在的低度全身性炎症可能是CECs升高的最关键因素。第二部分：15d-PGJ2通过NF-κB信号转导通路发挥其抗炎效应而减弱CSE介导的内皮损伤与功能障碍。