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本文以牡丹品种‘凤丹白’、‘乌龙捧盛’、‘珊瑚台’试管苗叶柄诱导的愈伤组织为材料,研究不同的植物生长调节剂、光质比例对愈伤组织继代增殖的影响,以及研究培养基不同成分对愈伤组织继代褐化的影响,同时对牡丹愈伤组织的总RNA提取方法进行探讨,为进一步研究牡丹分子生物学奠定基础。实验结果如下:1.以牡丹试管苗的叶柄为外植体诱导愈伤组织,并将诱导出的愈伤组织进行增殖培养,‘珊瑚台’愈伤组织以1/2MS+PVP+LH +NAA1.0 mg/L+KT0.3 mg/L处理的增重倍率最高,达5.15;在CCFL不同光质比例处理中,以对照处理的增重倍率最高,达1.11,纯红光、蓝光增殖效果优于红蓝光配比,白光效果最差;而‘凤丹白’愈伤组织在LED光质比例为80%R+20%B与70%R+30%B的条件下增殖效果较好,且差异不显著,其增殖倍率分别为0.47、0.45;在不同光强处理中以光强70μmol·s-1·m-2的增殖效果最好,增重倍率为0.57,且与其他各处理差异均显著;2.在光照条件为40μmol·s-1·m-2条件下,以1/2MS为基本培养基,‘珊瑚台’愈伤组织在NAA0.5 mg/L 1+6-BA0.5 mg/L和NAA0.5 mg/L +KT0.3 mg/L处理中褐化率最低,均为25%;‘凤丹白’愈伤组织在NAA0.1 mg/L +TDZ0.01 mg/L组合中褐化率最低为7.1% ;在黑暗条件下,‘珊瑚台’愈伤组织在1/2MS+PVP +LH +6-BA 1.0 mg/L +NAA0.5 mg/L培养基进行培养中,蔗糖添加量在50g/L的浓度下其褐化率最低,为4.55%;麦芽糖做糖源褐化率最低为4.76%;在黑暗条件下琼脂浓度及PH值对褐化有很大影响,‘乌龙捧盛’愈伤组织在中性偏酸的环境中生长较好,PH6.0、PH6.5条件下黑暗培养30天后,其愈伤组织褐化率为4%;琼脂浓度6.0g/L培养效果最好,愈伤组织生长良好,30天后褐化率为5%;3.在1/4MS+1/4Fe的改良MS培养基上,‘乌龙捧盛’愈伤组织继代培养的褐化率最低,为18.2%;从节省用工结合实际效果以20天继代周期为宜;从不同品种来看,‘珊瑚台’、‘乌龙捧盛’的愈伤组织褐化率都较‘凤丹白’严重;4.从愈伤组织总RNA提取试验看出,CTAB法较Trizol更适合多酚多糖的牡丹,此法虽然费时费力,但经济实用,提取效果比较好,且价格比试剂盒要便宜的多。