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目的：利用RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术，以DJ-1为靶基因，设计构建DJ-1-shRNA真核表达载体，进行测序鉴定，通过转染SGC7901胃癌细胞，检测该表达质粒对SGC7901胃癌细胞DJ-1基因表达的影响，为进一步研究DJ-1是否参与胃癌细胞的侵袭迁移、建立动物模型研究胃癌腹膜转移的分子机制奠定前期实验基础。方法：利用GeneBank中人DJ-1基因序列（NM007262）作为分析序列，依据http://www.ambion.com/techlib/misc/siRNAfinder.html上的设计原则，设计了靶向DJ-1基因的3条候选RNA干扰序列，与shRNA真核表达载体pGPU6/GFP/Neo构建重组质粒；同时设计并构建阴性对照RNA干扰重组载体，用于鉴定pGPU6/GFP/Neo质粒介导的RNA干扰体系的特异性，并对重组载体进行测序鉴定。将重组质粒转化Top10感受态大肠杆菌进行克隆，将克隆得到的重组质粒通过脂质体转染SGC7901胃癌细胞，采用RT-PCR，Western Blot法检测细胞中DJ-1mRNA和蛋白的表达。结果：重组质粒转化Top10大肠杆菌经氨苄青霉素抗性筛选可见有细菌克隆长出。经测序分析证实，靶向DJ-1基因的3个pGPU6/GFP/Neo-shRNA重组载体及阴性对照RNA干扰重组载体构建成功，分别命名为pGPU6/GFP/Neo-shDJ-1-A，pGPU6/GFP/Neo-shDJ-1-B，pGPU6/GFP/Neo-shDJ-1-C，pGPU6/GFP/Neo-shNC。RT-PCR法检测结果显示：pGPU6/GFP/Neo-shDJ-1-C转染组瞬时转染后靶基因DJ-1表达的抑制效果最强达78%以上，第2组阴性对照重组载体转染后DJ-1基因的表达无明显变化（P<0.01）；Westernblot法检测结果显示：pGPU6/GFP/Neo-shDJ-1-C转染组瞬时转染后靶基因DJ-1表达的抑制效果最强达75%以上，第2组阴性对照重组载体转染后DJ-1基因的表达无明显变化（P<0.01）。结论：成功构建了DJ-1-shRNA真核表达载体，pGPU6/GFP/Neo-shDJ-1-C可明显抑制SGC7901胃癌细胞DJ-1基因的mRNA和蛋白水平的表达。