免疫系统监视肿瘤发生是肿瘤免疫治疗的逻辑基础,因此免疫系统对肿瘤抗原的识别能力是决定肿瘤免疫效果的关键因素。本文以小鼠结肠癌MC38细胞为研究对象,针对组蛋白的甲基化和乙酰化两种修饰展开研究,筛选出能够显著影响免疫相关分子表达的靶点,通过对这些靶点的阻断,使免疫浸润度低的肿瘤转化为免疫浸润度高的肿瘤,从而使患者更好的响应免疫治疗。通过对JMJD3、Sirtuin2、Ezh2等多个靶点进行小分子抑制剂的筛选,联合应用流式细胞术及荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法,检测促进/抑制免疫应答的多种分子标记物的表达,确定靶点后用CRISPR/Cas9技术得到靶点敲除的单克隆细胞株,最后结合蛋白印迹法(Western blot)和qRT-PCR技术来观察敲除效果。在J4的研究中,发现JMJD3的特异性抑制剂J4处理的MC38细胞增殖速度显著低于对照组,并且在mRNA和蛋白质水平均上调MHC I、CXCL9和PD-L1的表达。为避免上述结果是由于小分子抑制剂的脱靶所致,用敲除株细胞与MC38细胞进行二次验证,实验证明了敲除株细胞中MCH I和PD-L1的表达显著高于MC38细胞系。在AGK2的研究中发现其处理MC38细胞时可显著上调MHC I、MHC II和CD39的表达。而AGK2处理T细胞后,细胞存活无显著区别,TNFα、IL-2和Mito Tracker Green的表达下调,CD62L的表达显著上调。综上,两种小分子抑制剂的实验结果表明,组蛋白去甲基化酶JMJD3的抑制剂GSKJ4对MC38细胞的增殖起到明显的抑制作用,并能增强抗原基因表达、促进趋化因子的分泌,说明JMJD3对结肠癌的治疗具有重要的意义。其次,研究表明组蛋白去乙酰化酶Sirtuin2的抑制剂AGK2可以显著上调CD62L的表达,而CD62L是记忆型T细胞的主要标志,表明AGK2的处理可能诱导记忆型T细胞形成。