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桑黄(Phellinus igniarius)是针层孔菌属真菌火木层孔菌的子实体,一种珍贵的多年生大型药用真菌,寄生于杨、桑、柳、白桦、杜鹃等树干上,在我国大部分地区均有分布。桑黄素有“森林黄金”之美称,最新研究表明桑黄还有独特的抗癌、抗肿瘤等多种功效,是目前国际公认的生物治癌领域效率最高的一种药用真菌,已成为国内外研究热点。本实验将桑黄的干燥子实体用70%乙醇提取三次,得到乙醇提取浸膏,加水溶解后依次加入等体积的二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,依次得到二氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层的干燥浸膏。为了研究桑黄的抗肿瘤活性,对萃取层进行了活性筛选实验,结果显示桑黄二氯甲烷萃取层对人宫颈癌细胞(HeLa)和人肝癌细胞(Hep G2)的抑制作用在萃取层中最高,对HeLa、Hep G2细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为31.1、58.9μg/mL,因而本实验对桑黄二氯甲烷层进行了进一步活性成分研究。利用各种柱层析方法,包括正相硅胶、反相硅胶、葡聚糖凝胶、高效液相色谱仪和高速逆流色谱等手段,对桑黄70%乙醇提取物的二氯甲烷层进行了化学成分研究,从中分离得到8个单体化合物,并进一步通过波谱学(1H-NMR、13C-NMR、 DEPT-135等)和物理化学方法鉴定的结构分别是：3-乙酰氧基齐墩果酸(Ⅰ)、羽扇豆醇(Ⅱ)、3-羟甲基-4α,14α,20R-三甲基-9,19-环-24-乙烯基-5α-胆甾烷(Ⅲ)、23-羟基白桦酸(Ⅳ)、β-谷甾醇(V)、白桦脂醇(Ⅵ)、3p-羟基-20a-甲基齐墩果-13(18)-烯-29-甲酸(Ⅶ)、1β,3β,11α-三羟基羽扇豆醇(Ⅷ),以上8个化合物均从桑黄植物中首次分离得到。采用MTT方法,对化合物Ⅰ-Ⅷ进行了肿瘤细胞生长抑制实验,结果化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ和Ⅶ对人宫颈癌HeLa细胞生长有较强的抑制作用,IC5o分别为6.6、20.0、35.9、9.7、21.4μM,化合物Ⅰ、Ⅵ、Ⅶ和Ⅷ对人肝癌Hep G2细胞生长有较强的抑制作用,IC50分别为9.9、23.5、9.8、32.4μM。本课题在一定程度上对桑黄的抗肿瘤活性成分增加了了解,为进一步研究开发新的抗肿瘤活性物质提供了科学依据。