大鼠C6胶质瘤细胞进行阿霉素化疗后热休克因子1和P-糖蛋白表达关系的研究

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目的 神经胶质细胞瘤是中枢神经系统常见的恶性肿瘤。实践证明:化疗是继胶质瘤手术切除之后的诸多治疗环节中至关重要的一环。但“化疗耐药”是继“透过血脑屏障”之外胶质瘤化疗的又一大难题。肿瘤临床治疗失败最主要的原因之一就是发生肿瘤细胞的多药耐药(Multidrug risistance, MDR)。研究发现MDR的一个最主要的原因就是在肿瘤细胞中过度表达P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)。与多药耐药相关的P-gp是由多药耐药基因-1(Multidrug resistance gene 1, mdr1)编码。 热休克因子(heat shock factor, Hsf)是一组结构和功能具有广泛同源性,普遍存在于真核生物细胞中的蛋白质,调控热休克蛋白(heat shock protein, HSP)家族基因的表达。Hsfl对应激条件敏感,可在应激条件下由单体结合成三聚体,与热休克基因上游的热休克元件(Heat shock element, HSE)结合,促进HSP基因的高效转录。 最近研究发现Hsf1不仅能够调节热休克蛋白的表达,而且与P-gp表达调控有关。研究发现mdr1基因启动子中包含数个HSE,热休克或亚砷酸钠可以激活Hsf1,增加mdr1表达水平。本实验旨在观察抗肿瘤药物阿霉素(adriamycin, ADM)化疗后C6细胞中Hsf1和P-gp的表达变化。 方法 1.将ADM溶于培养液中,浓度为2ug/ml。将C6细胞在含有ADM的培养液中培养4h。 2.采用Western blot检测化疗前、化疗后2h、4h、8h、12h、24h时Hsf1和P-gp的表达;以及化疗前1h分别应用浓度为10umol/L、100 umol/L、500
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