喜树内生放线菌Streptomyces sp.W112次级代谢产物的研究

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抗生素的主要来源是放线菌,其中主要是植物内生放线菌。由于植物内生放线菌的特殊生境,使得它们具有与土壤放线菌不同的代谢方式和功能,能产生一些抗菌、抗肿瘤、抗炎等生物活性的新物质,具有较大的药用价值。在新药开发、农业和生物等多领域都具有突出贡献和重大意义。本文对喜树内生放线菌Streptomyces sp. W112突变株的次级代谢产物进行研究,采用正相、反相硅胶柱层析RP-18、葡聚糖凝胶柱层析(Sephadex LH-20)、中压以及高效液相色谱等技术对其发酵产物进行分离纯化,共得到22个纯化合物,应用波谱学方法和X射线单晶衍射技术鉴定了其结构,其中包括新化合物8个,并测定了部分化合物对细菌III型分泌系统(Type three secretion system, T3SS)的毒性蛋白的抑制活性。对编码divergolides类化合物的正调控基因div8过表达得到的突变株Streptomyces sp. W1120Ediv8分别采用Waksman合成培养基和燕麦培养基(ISP3)进行固体平板发酵。从Waksman培养基的发酵提取物中分离并鉴定了9个化合物,包括吲哚甲酸(WG-1),两个苯甲酸衍生物(WG-3、WG-4),一个甜菜碱类化合物(WG-5),四个安莎类衍生物(WG-6、WG-12、WG-15、WG-17)和一个倍半萜(WG-13)。其中WG-12、WG-15和WG-17为新化合物。从燕麦培养基(ISP3)发酵提取物中分离鉴定了13个化合物,包括一个苯甲酸衍生物(N1),六个divergolide A系列化合物(YS-181、YS-182、YS-361、YS-342、D2-1、 D2-2),三个divergolide C系列化合物(YS-35、YS-352、YS-38),三个DivergolideD系列化合物(B4、YS-22、YS-12),其中YS-342、D2-1、D2-2、YS-22和YS-12为新化合物。本论文研究表明,喜树内生放线菌Streptomyces sp. W112具有产生九酮安莎divergolides潜能;通过对divergolides基因过表达突变株的分离,得到了结构多样化的该类化合物,进一步表明通过分子生物学手段对生物合成基因簇进行遗传操作对挖掘放线菌的次级代谢产物的多样性具有重要意义。
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