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hPepT2（Human Peptide Transporter，SLC15A2）是一种转运小肽的蛋白质载体，主要参与肾脏内二肽和三肽的重吸收。PepT2由729个氨基酸组成，含有12个跨膜结构域。除小肽外，一些类肽药物也是PepT2的底物。利用肽转运载体来促进药物或前体药物的吸收已成为生物药剂学的一个新研究领域。而应用基因表达技术可以大量表达外源蛋白质，是研究功能蛋白的热门手段。大肠杆菌表达系统是基因表达技术中常用的重要工具，但真核基因若含有较多原核细胞无法识别的稀有密码子，会使其在原核细胞中无法表达或表达中断，因此本研究通过在原核细胞表达体系中表达hPepT2片段蛋白，以研究这些片段蛋白的功能。采用PCR技术扩增了hPepT2的PepT2（1-174）和PepT2（624-729）编码区，将其分别重组到质粒pET30a（+）和pUC18上，获得了重组质粒pET30a（+）/hPepT2（1-174）和pUC18/hPepT2（624-729），将其转化到大肠杆菌BL21（DE3）中，成功构建了pET30a（+）/hPepT2（1-174）/BL21（DE3）和pUC18/hPepT2（624-729）/BL21（DE3）表达体系。并利用SDS-PAGE法研究了ITPG诱导表达的条件，结果表明ITPG诱导表达4h时，片段蛋白的表达总量趋于稳定。采用Fmoc合成法合成了L-dopa-L-Tyr、L-dopa-L-His、L-dopa-L-Tyr-Tyr三种左旋多巴肽类衍生物，通过高效液相色谱技术对产物进行了分离和纯化，并进行了ESI-MS、1HNMR、13CNMR表征。利用紫外光谱法、荧光光谱法和琼脂糖凝胶电泳法研究了左旋多巴肽类衍生物与DNA的相互作用。左旋多巴肽类衍生物与ctDNA相互作用后，体系的紫外吸收光谱呈减色效应，推测是其与ctDNA之间发生了疏水相互作用或嵌插作用而引起的DNA分子超螺旋结构收缩所致；体系荧光光谱也呈减色效应，通过Stern-Volmer方程，得出三种衍生物对DNA-EB的猝灭常数均远大于小分子化合物与生物大分子之间最大扩散控制的碰撞常数2×1010L·mol-1·s-1，因此，可推测这三种左旋多巴肽类衍生物对DNA-EB的猝灭作用都是静态猝灭。而左旋多巴肽类衍生物与pUC18DNA相互作用后，pUC18的迁移速率变慢，可能是左旋多巴肽类衍生物与pUC18DNA发生嵌插作用形成复合物所致。实验结果表明，与L-dopa相比，左旋多巴肽类衍生物与DNA相互作用更强，且随着肽链的增长，化合物与DNA之间的相互作用增强。