基于肠-肾轴理论探讨益肾汤经结肠透析对慢性肾衰竭大鼠肾组织NF-κB、MCP-1表达的影响

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目的:观察慢性肾衰竭大鼠经益肾汤结肠透析后肾组织NF-κB、MCP-1表达的情况,为益肾汤防治慢性肾衰竭提供理论依据。方法:60只雄性SD系健康大鼠中随机抽选15只为正常组,剩余45只按照Yokozawa法即采用2.5%腺嘌呤混悬液灌胃,按照200mg/kg.d的剂量,连续28天建立慢性肾衰模型。随机将其分成模型组、结肠透析组、益肾汤结肠透析组;4组均给予自由饮食,两治疗组给予透析液进行结肠透析,益肾汤结肠透析组同时予以益肾汤保留灌肠。治疗时间为4周,治疗期间每周对大鼠进行称重并记录;4周末采集大鼠动脉血,分别对各组血清Scr、BUN、LPS、TNF-α进行检测;4周末摘取肾脏进行处理,包括制作病理切片、HE染色、免疫组化,最后光镜下观察肾组织形态结构及NF-κB、MCP-1阳性表达情况,具体光密度值由图像处理软件计算。用SPSS26.0统计软件分析实验过程中各项数据。结果:(1)造模后结果:相较正常组,造模后大鼠体型弱小,毛色光亮度减退,自由活动减少;血肌酐升高;肉眼可见肾脏表面弥漫凹凸不平的白色颗粒;光镜下可见肾小球总体数量下降、球囊与毛细血管襻比例失衡,即球囊增厚,血管团皱缩;肾小管肿胀或萎缩,部分肾间质纤维化并伴炎症细胞浸润。(2)大鼠体重变化比较:造模后,相较正常组,3组大鼠的体重增长较慢(P<0.05);治疗4周后,相较模型组,经益肾汤结肠透析后,大鼠一般状态好转,体重增长明显(P<0.05);结肠透析组体重与模型组无统计学意义(P>0.05)。(3)血清生化指标结果比较:治疗4周后,相较正常组,模型组血清Scr、BUN、LPS、TNF-α水平升高(P<0.05);相较模型组,两治疗组血清Scr、BUN、LPS、TNF-α水平下降(P<0.05);经益肾汤结肠透析后,大鼠血清Scr、BUN、LPS、TNF-α水平较结肠透析组下降(P<0.05)。(4)肾脏组织病理变化:与正常组相比,模型组可见相同倍数下肾小球总体数量下降、球囊与毛细血管襻比例失衡,即球囊增厚,血管团皱缩;肾小管肿胀或萎缩,部分肾间质纤维化并伴炎症细胞浸润。两治疗组上述病理损伤较轻,益肾汤结肠透析后减轻更为明显。(5)免疫组化结果显示:大鼠肾组织NF-κB、MCP-1在模型组中表达较正常组升高(AOD P<0.05);两治疗组NF-κB、MCP-1表达水平较模型组出现不同程度的下调(AOD P<0.05);经益肾汤结肠透析后,其表达水平较结肠透析组下调(AOD P<0.05)。结论:益肾汤经结肠透析可能通过下调CRF大鼠肾组织NF-κB、MCP-1的表达,起到抑制肾脏炎症反应,改善肾脏纤维化的作用,其效果更优于单纯结肠透析。
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