水体中微囊藻毒素的分析提纯及去除实验研究

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随着水体富营养化问题的日益加剧,蓝藻水华大面积暴发所带来的微囊藻毒素(MC)的污染已成为一个全球关注的环境问题。MC是肝毒素和肿瘤促进剂,其分子结构复杂、种类繁多,化学性质稳定,以痕量形式稳定地存在于各类富营养化的天然水体中,传统的处理工艺难以有效去除,这对人类健康构成了极大的潜在威胁。本文以微囊藻毒素MC-LR为目标物,对其分析方法、提纯方法进行了实验研究,并考察了UV、O3、UV/O3三种工艺对MC-LR的去除效果。通过对高效液相色谱法(HPLC)中流动相种类、流动相配比、检测波长、流动相流速和柱温的确定,建立了MC-LR的HPLC检测方法,该方法有较好的重现性和精密度;通过对固相萃取(SPE)富集MC-LR过程中淋洗液和洗脱液的选择,确定了富集MC-LR的方法,回收率可达92.12%。经实验,本文建立的SPE-HPLC很适合本实验中MC-LR的分析。利用光照培养箱进行铜绿微囊藻的培养,使实验室中铜绿微囊藻数量具有了一定规模。以其为原料制备干藻粉,从干藻粉中进行MC-LR的提纯。通过对提取剂、细胞破碎方式、剂量比、细胞破碎次数等因素的考察,确定了最佳提取方法;对粗提液进行脱甲醇浓缩后再考虑其色素和杂质的去除;最后用优化好的SPE-HPLC对MC-LR进行定量分析。经实验,按优化好的方法进行MC-LR的提纯,每克干藻粉中可获得约330μg的目标毒素。通过对MC-LR的标样及上述干藻粉提取液进行液相色谱-二级质谱(LC-MS/MS)分析,在分析谱图中可以看到MC-LR m/z=995.80的特征离子和m/z=600.09、m/z=977.51的特征碎片离子。从而可以对MC-LR做出准确定性。对目标毒素洗脱液进行脱甲醇处理后,将残留物用高纯水溶解,即得到MC-LR的水溶液,可用于去除实验研究。本文考察了UV、O3、UV/O3三种工艺对MC-LR标样及提取液的降解效果。实验结果显示,三种工艺对MC-LR都有较好的降解效果。在反应进行30min时,降解率均在90%以上;对于UV工艺,其对提取液中MC-LR的降解率高于MC-LR标样的降解率,O3、UV/O3工艺中则相反;腐殖酸的存在会在一定程度上抑制三种工艺对MC-LR的降解。
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